加急见刊

非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

赵亚茹; 韩蓉; 杨吉飞; 牛庆丽; 关贵全; 罗建勋; 刘光远; 殷宏; GRZEGORZ; Wozniakowski; 刘志杰 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室; 甘肃兰州730046; Department; of; Swine; Diseases; National; Veterinary; Research; Institute; 24-100; Pulawy; Poland; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 江苏扬州225009

摘要：将合成的非洲猪瘟病毒K205R基因序列插入pET-28a(+)表达载体,经IPTG诱导表达pET-28a-K205R重组蛋白。用制备的重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用化学融合方法融合、筛选,获得了6A4、7F5和7G3三株抗K205R蛋白的杂交瘤细胞株。经鉴定,这3株单克隆抗体(单抗)的亚类均为IgG1型;单抗的腹水效价分别为1∶51200、1∶409600和1∶102400。将这3株杂交瘤细胞连续培养20代,在第20代仍有很高的分泌抗体的能力,表明其稳定性较好。Western-blot检测结果表明,这3株单抗与K205R重组蛋白有良好的反应性和特异性。上述结果表明,本研究制备的这3株杂交瘤细胞株能够稳定分泌抗体,分泌的抗体特异性高,为非洲猪瘟诊断技术的研究奠定了基础。

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