中国兽医科学杂志文献阅读_检测猪鼻支原体抗原的ELISA方法的建立及其应用

检测猪鼻支原体抗原的ELISA方法的建立及其应用

朱红振; 危艳武; 黄立平; 刘丹; 夏德利; 吴洪丽; 边海桥; 冯力; 刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 黑龙江哈尔滨150069

摘要：为了建立检测猪鼻支原体(Mhr)抗原的ELISA方法,本研究采用杂交瘤技术制备了抗Mhr菌体的特异性单克隆抗体(MAb),经亲和层析纯化后标记辣根过氧化物酶(HRP),建立了一种能够检测Mhr抗原的ELISA方法。ELISA反应条件优化结果为:HRP标记的MAb最适稀释度为1∶1000,该方法的批内和批间变异系数均小于6%,经超声波处理Mhr抗原效果更佳,最低抗原检出量为25ng。用该方法对已知猪肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)抗原检测无交叉反应。本研究建立的检测Mhr抗原的ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为Mhr体外培养物抗原定量检测提供可靠的技术手段。

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