加急见刊

JWA蛋白时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立

孙康俊; 王晓颖; 徐瑞彤; 李爱萍; 周建伟 南京医科大学公共卫生学院; 南京211166; 江苏省人民医院全科医学科; 南京210036

摘要:目的:建立时间分辨荧光免疫层析法检测JWA蛋白的体系,并对该法进行评价。方法:运用EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)-NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化时间分辨荧光微球,活化的时间分辨荧光微球按100μg Ab∶1 mg微球标记JWA单克隆抗体7C3;将荧光标记的抗体运用于免疫层析检测。结果:时间分辨荧光微球成功标记JWA单克隆抗体,荧光标记的7C3可以准确识别JWA多肽;测量范围可从20 ng·mL-1至1500 ng·mL-1,线性范围可达100 ng·mL-1~1000 ng·mL-1,回收率在95%以上,高、中、低浓度的重复性检测离散度(CV)均小于10%,加速稳定性亦较好,同时可以检测出胃癌细胞中的JWA蛋白。结论:本研究建立的时间分辨免疫荧光层析法测定JWA蛋白,各项分析性能良好,且便捷准确、快速经济,为检测JWA蛋白提供了一种高效的新途径。

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