加急见刊

H5N8亚型流感病毒双重实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价

孙洁; 廖立珊; 于力; 吴绍精; 刘建利; 陶虹; 杨俊兴; 曾少灵; 林彦星; 黄超华; 林庆燕; 秦智锋 深圳海关原深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心; 广东深圳518001; 深圳市检验检疫科学研究院; 广东深圳518000; 深圳海关原深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心; 广东深圳518001

摘要:流感病毒变异迅速,为研究和建立一种针对H5N8亚型流感病毒核酸准确灵敏的检测方法,分别选择H5N8亚型流感毒株序列相对保守的HA基因和NA基因作为H5N8亚型流感病毒检测的靶序列,设计两套特异性的引物和探针,选择两种不同的荧光标记,建立基于TaqMan探针的双重荧光RTPCR快速检测H5N8亚型禽流感病毒检测方法。实验结果表明,所建立的H5N8亚型流感病毒real time RT-PCR检测方法HA基因检测的灵敏度为10^-5,NA基因检测的灵敏度为10^-5,重复性好。特异性佳。结果表明:本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测H5N8亚型流感病毒,耗时短,可很快作出判定结果,适用于H5N8流感病毒的分子生物学检测和监测。对于控制流感流行,减少经济损失,最大限度保护社会人群健康具有很大意义。

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