加急见刊

Alexa Fluor 488 NHS Ester染料提高流式细胞周期检测结果的可行性

张鹏; 彭涛; 范安然; 兰金芝; 何志旭; 舒莉萍; 周艳华 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室; 组织工程与干细胞实验中心; 贵州省再生医学重点实验室; 贵州贵阳550004; 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室; 贵州贵阳550004; 遵义医科大学附属医院儿科学教研室; 贵州遵义563000

摘要：目的:探讨Alexa Fluor 488 NHS Ester染料用于提高流式细胞周期检测结果的可行性。方法:以293细胞作为研究对象,采用两种方案进行细胞周期检测,每种方案设4组;方案一,按照细胞周期检测试剂盒的说明书对4组细胞进行染色;方案二,先对4组细胞用0.0、0.4、2.0及10.0 mg/L的Alexa Fluor 488 NH S Ester染料染色15 min,然后将4组细胞混合在一支试管中再用碘化丙啶(PI)进行染色;将两种染色方案获得的细胞上流式细胞仪检测,分析比较两种方案的4组细胞检测结果。结果:方案一染色的4组细胞,流式细胞仪检测结果不尽一致,个别组间由于细胞密度不同导致染色结果存在差异;方案二经不同浓度Alexa Fluor 488 NHS Ester染色的4组细胞虽然混合于一支试管,检测结果经Flowjo X软件分析时能明显分出4群细胞,对4群细胞分别进行细胞周期分析比较,结果一致。结论:采用不同浓度Alexa Fluor 488 NHS Ester染料预染细胞后混合在一起进行PI染色能够提高细胞周期检测结果的可信度,在神经退行性疾病研究中可节约病人的取样次数及数量。

注: 保护知识产权,如需阅读全文请联系贵州医科大学学报杂志社