聚乙烯亚胺增强Pluronic介导的BALB/c小鼠骨骼肌原位基因传递和表达效率
摘要：目的 在Pluronic L64介导的BALB/c小鼠骨骼肌基因传递体系中正确引入聚乙烯亚胺(PEI)以增强基因表达效率。方法以生理盐水组、质粒DNA (p DNA)组和Pluronic L64/p DNA (L/D)组为对照组,各比例PEI/p DNA与Pluronic L64混合物(L/P/D-0. 5、L/P/D-3、L/P/D-10)为实验组,将各组样品注射到小鼠胫骨前肌中。7 d后取组织,检测报告基因表达(β-半乳糖苷酶和荧光素酶)和肌肉组织病变情况。通过尾静脉注射考察L/P/D-0. 5组的体内急性毒性。最后,通过动态光散射仪和原子力显微镜测定L/P/D-0. 5组中PEI/p DNA复合物的粒径、电位及形貌。结果 1)报告基因表达评估:L/P/D-0. 5组外源基因表达效率最高;随着N/P增加,几乎检测不到外源基因的表达。2)生物相容性评估:无论原位注射还是尾静脉注射,L/P/D-0. 5组均没有显示出组织病变,而其他比例的L/P/D组出现了不同程度的组织学病变。3)物理特征表征:虽然在L/P/D-0. 5组中DNA未被完全压缩,但PEI/p DNA复合物已拥有良好的纳米粒径和形态结构,且表面电位为负。结论 L/P/D-0. 5体系能安全有效地增强外源基因在骨骼肌内的表达。
注: 保护知识产权,如需阅读全文请联系四川动物杂志社
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