剪切力对成纤维细胞中p38和CREB活性影响和作用机制
摘要:目的探讨剪切力对成纤维细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)活性影响及其调控机制.方法将成纤维细胞传代于培养皿中,细胞贴壁后采用不同作用时间和强度的剪切力(Shear stress)作用于成纤维细胞.为了探索剪切力作用的机制,分别加入活性氧(ROS)抑制剂过氧化氢酶和钙离子螯合剂BAPTA预处理成纤维细胞,剪切力作用30min后收集细胞.采用免疫印迹方法分别检测细胞中p38、CREB的活性.结果剪切力呈时间和强度依赖性方式促进成纤维细胞中p38、CREB磷酸化升高;在5dyn/cm2强度下,p38和CREB活性在10~30min时段逐步升高;在剪切力5dyn/cm2和7dyn/cm2作用30min后,p38和CREB的磷酸化水平均出现明显升高.ROS抑制剂Catalase抑制剪切力作用下成纤维细胞p38和CREB磷酸化,而钙离子螯合剂BAPTA增强p38和CREB磷酸化.结论剪切力通过ROS途径促进成纤维细胞中p38和CREB的磷酸化.
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