加急见刊

大鼠脊髓损伤早期CNTF与NT-4表达变化及其相互关系

牛英杰; 吴潘娜; 胡析; 王若遥; 何晶晶; 李盈洁; 彭婵娟; 张晓; 冉黎 成都医学院; 成都610500

摘要:目的 探讨内源性睫状细胞神经生长因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)和神经营养因子4(neurotrophin-4, NT-4)在大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)早期的表达变化及其相互关系,为SCI神经营养因子疗法提供理论依据。 方法 成年Sprague Dawley(SD)大鼠45只随机分为假手术(Sham)组、SCI-12h、SCI-1d、SCI-3d和SCI-7d组( n =9)。各SCI组大鼠均采用改良Allen's法制备T10节段脊髓顿挫伤模型,用BBB(Basso-Beattie-Bresnahan locomotor, BBB)评分法评估各组大鼠后肢运动功能;采用荧光定量PCR(Q-PCR)及免疫组织化学染色检测大鼠脊髓顿挫伤后CNTF与NT-4的表达情况;利用GeneMANIA数据库对CNTF与NT-4的相互作用进行预测分析。 结果 术后Sham组大鼠BBB评分不变,SCI组大鼠损伤平面以下完全瘫痪,BBB评分为0,SCI-7d组评分较SCI-12h组高( P <0.01),但仍低于Sham组( P <0.01)。与Sham组相比,SCI-12h组CNTF mRNA相对表达量降低( P <0.05),于SCI-3d组降至最低( P <0.05);NT-4 mRNA相对表达量在SCI-12h组无变化,于SCI-1d组表达增高( P <0.05),至SCI-7d组表达降低( P <0.01),但与Sham组比较差异无统计学意义( P >0.05)。免疫组织化学染色结果显示,CNTF在神经元与神经胶质细胞均有表达,NT-4主要在神经元表达。与Sham组相比,CNTF 与NT-4阳性神经元数量及IOD值均在SCI-12h组减少( P <0.01);两种蛋白质随后呈现不同的变化趋势:脊髓前角CNTF阳性神经元数量与IOD值分别在SCI-3d组与SCI-7d组再次降低( P <0.01);而NT-4阳性神经元与IOD值分别在SCI-7d组与SCI-3d组增高,表达水平接近Sham组。脊髓后角CNTF阳性神经元数量在SCI-1d组再次降低( P <0.01),至SCI-7d组无变化;NT-4阳性神经元数量及其IOD值分别在SCI-1d组及SCI-7d组增高( P <0.01),且SCI-7d组与Sham组比较差异无统计学意义( P >0.05)。

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