人源S100A8重组质粒的构建及其对他莫昔芬治疗乳腺癌的影响
摘要：目的 构建人源S1000A8的重组质粒，并在人乳腺癌细胞MCF7中表达，初步探索其对他莫昔芬处理下MCF7细胞的影响。 方法 设计合成针对人源S100A8基因cds区的引物序列，采用PCR的方法以人乳腺癌细胞MCF7的cDNA为模板，扩增目的基因S100A8，经过NdeⅠ和BamHⅠ双酶切后，克隆至pCMV5-myc质粒上。通过脂质体转染至MCF7细胞中，应用Western Blot法检测其蛋白表达。脂质体转染S100A8至MCF7细胞并应用他莫昔芬处理后，用MTT法检测其细胞活力，Western Blot法检测相关蛋白表达。 结果 酶切鉴定证明S100A8基因重组质粒构建成功，并且可以在MCF7细胞中过表达。MTT法显示S100A8可以部分逆转他莫昔芬所造成的细胞活力下降，部分抗凋亡分子表达上升。 结论 人源S100A8基因的重组质粒构建成功，为进一步研究S100A8在乳腺癌对他莫昔芬发生耐药的过程中的作用奠定了基础。
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