辣椒碱通过激活结肠癌细胞NLRP3炎性小体进而促进结肠癌转移的分子机制研究
摘要:目的 研究辣椒碱促进结肠癌转移的作用及其机制是否与NLRP3炎性小体的活化有关。 方法 通过酶联免疫吸附实验检测辣椒碱对结肠癌SW480和HCT116细胞的炎症相关分子IL-1β、IL-6 及TNF-α的表达;采用蛋白质免疫印迹检测辣椒碱对结肠癌SW480细胞和HCT116 细胞内NLRP3和EMT相关标志性蛋白的变化;采用Tanswell检测辣椒碱和MCC950共处理后结肠癌细胞迁移能力的变化;通过免疫印迹检测辣椒碱处理结肠癌细胞SW480和HCT116与NLRP3特异性抑制剂MCC950分别共处理结肠癌后,NLRP3和EMT相关标志性蛋白的变化;通过流式细胞仪检测ROS 抑制剂NAC处理结肠癌细胞后胞内ROS的变化。 结果 辣椒碱处理结肠癌细胞SW480和HCT116后,胞内炎性因子明显上升,NLRP3表达量增加,同时上调间质样标志物Vimentin的表达,下调上皮样标志物E-cadherin 表达。但用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞之后,炎性因子表达量下调,NLRP3蛋白水平和EMT 现象也被明显抑制。而MCC950处理后能抑制辣椒碱增加的细胞迁移数量。ROS 抑制剂NAC能逆转辣椒碱诱导结肠癌细胞NLRP3的蛋白水平。 结论 辣椒碱通过促进结肠癌细胞内ROS 的表达水平来激活NLRP3炎性小体,进而促进结肠癌细胞的转移。
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