基于微流控高分辨率熔解曲线的基因分型研究
摘要：目的建立一种用于人类乙醇脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase 2, ALDH2)基因单核苷酸多态性位点准确快速分型的方法。方法将微流控芯片、实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与高分辨率熔解曲线技术相结合。采用聚合物材料制作微流控芯片,在确保熔解过程中温度变化的均一性和精确性的同时,可显著改善热能传输,提高热循环速度,缩短分析时间,从而实现对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的快速检测与分析。结果在自主研制的微流控高分辨率熔解曲线分析系统上,以标准质粒为实验材料,测试了该系统的最低检测限可达10 copies/μL。同时,成功地实现了人类ALDH2基因三种基因分型(AA/GG/AG)的检测。结论微流控高分辨率熔解曲线分析系统为ALDH2基因分型提供了一种准确快速的检测方法,对指导临床硝酸甘油的个性化用药具有重要意义。
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