加急见刊

樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析

浦月霞; 刘龙山; 龚美霞; 冉艳萍; 贾雪峰; 黄景滩; 宋宪军; 安春梅; 唐顺明 广西壮族自治区蚕业技术推广总站; 南宁530007; 江苏科技大学生物技术学院; 江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室; 江苏镇江212018; 中国农业科学院蚕业研究所、农业部蚕桑遗传改良重点实验室; 江苏镇江212018

摘要：樗蚕（Philosamia cynthia cynthia）是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c DNA,命名为Pcc HE（Gen Bank登录号：MH119084）。Pcc HE基因c DNA全长为964 bp,由5＇-UTR、3＇-UTR和885bp的ORF组成,编码294个氨基酸;Pcc HE蛋白序列含有孵化酶特征序列锌指结合基序和Met-转角基序;基于Pcc HE氨基酸序列与16种动物孵化酶同源氨基酸序列构建的系统进化分析树显示,樗蚕与蓖麻蚕之间的亲缘关系最近。半定量RT-PCR检测Pcc HE在樗蚕胚胎发育早期的表达维持在较低水平,催青第3天小幅度增加,第9天时表达水平开始大幅上升,至孵化前达到最高水平;Pcc HE在5龄3 d幼虫中肠中高水平表达,并且在马氏管中也有表达,这是首次在昆虫马氏管中发现孵化酶基因的表达。上述结果表明,Pcc HE与樗蚕的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。

注: 保护知识产权,如需阅读全文请联系蚕业科学杂志社