白介素12A对CD4+CD25+Foxp3+Treg增殖分化的促进作用
摘要：目的:研究白介素12A(IL-12A)促进CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+Foxp3+Treg(iTreg)增殖分化的作用。方法:采用免疫磁珠分选法分选出脐带血中CD4+CD25-T细胞,实验组和对照组均采用抗CD3和抗CD28单克隆抗体活化,并加入10ng/mL的TGF-β1诱导,而实验组加入5ng/mL的IL-12A同时诱导。细胞培养72h后,采用流式细胞术(FACS)检测CD4+CD25+Foxp3+Treg(iTreg)细胞的比例,蛋白免疫印迹(Western-Blot)法检测细胞中Foxp3、Smad2、Smad3、Smad6的表达,实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Foxp3、Smad2、Smad3、Smad6的mRNA表达。体外共培养诱导后iTreg和CD4+CD25-T细胞,CCK-8法评价淋巴细胞活性。体外加入5ng/mL的IL-12A与iTreg、CD4+CD25-T细胞共培养检测IL-12A协同iTreg对于CD4+CD25-T细胞活性的影响。结果:FACS检测,IL-12A可以促进CD4+CD25-T向iTreg的分化,CCK-8结果显示,iTreg可以以浓度依赖方式抑制CD4+CD25-T细胞活性。而IL-12A可以协同iTreg对于CD4+CD25-T细胞活性的抑制作用。Western-Blot和RT-QPCR结果显示,iTreg分化过程中Foxp3、Smad2、Smad3、Smad6的表达水平增高,且相关mRNA的水平也增高。结论:IL-12A可以促进iTreg的诱导分化,对于效应T细胞的抑制有着一定的协同作用。
注: 保护知识产权,如需阅读全文请联系中国临床药理学与治疗学杂志社
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