安徽工程大学学报杂志文献阅读_磷酸水解酶对大肠杆菌工程菌合成番茄红素的影响

磷酸水解酶对大肠杆菌工程菌合成番茄红素的影响

刘洋洋; 王天民; 郭佳慧; 张翀; 薛正莲; 邢新会安徽工程大学生物与化学工程学院; 安徽芜湖241000; 清华大学化学工程系生物化工研究所; 北京100084; 清华大学合成与系统生物学中心; 北京100084

摘要：实验以大肠杆菌DH1为宿主菌，在已有生产番茄红素大肠杆菌工程初始菌株lyc001的基础上，增加合成番茄红素途径中的关键基因crtEIB拷贝数；表征结果表明，相较于初始菌lyc001，番茄红素产量提高了34％，并将此菌命名为lyc011．利用CRISPR干扰（CRISPR interference，CRISPRi）原理以及Golden-Gate组装方法成功构建了可以靶向得到的57个磷酸水解酶基因的双single guide RNA（sgRNA）的质粒．将dCas9质粒和sgRNA表达质粒导入lyc011菌株中，通过下调这57个磷酸水解酶基因表达量，最终通过发酵表征成功筛选到了15个对番茄红素产量提高具有正向调节结果的磷酸水解酶基因，分别为：yjjG，aphA，nagD，yqaB，yidA，pphA，bacA，glpQ，pgpB，spoT，cpdB，nudd，dgt，phoQ．

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