疏水蛋白HGFI用于载基因组织工程支架的研究
摘要：以具有两亲性的疏水蛋白HGFI为基础,通过正负电荷的相互作用将质粒与PEI的复合体固定在了修饰有疏水蛋白HGFI的PCL支架材料上.对不同时间段释放的质粒进行了定量测量并绘制曲线,结果表明载基因支架上的基因有四分之三左右在固定的12 h内释放.用载基因支架进行体外293T的转染实验,载基因支架的转染效率为21.76%.该转染效率与直接用转基因试剂对贴壁细胞转染的效率低很多,但对于组织工程支架来说,已具有一定的基因递送功能.大鼠皮下埋植实验表明,在体内埋植3 d后,载基因支架有着良好的体内转染效果,对体内的转基因阳性细胞进行初步检测发现,支架埋植初期有大部分被转染细胞为巨噬细胞,而对巨噬细胞进行转染是否对组织修复有益还需进一步的研究.大鼠皮下埋植2 w后,对埋植的材料进行血管化的检测,组织切片进行vWF免疫荧光染色和成像,成像结果说明载基因支架显著地促进了支架材料在体内的血管新生,推测支架上固定的质粒在体内转染后表达出了目的蛋白e NOS,从而促进了支架材料周围组织的血管化.本实验中,载基因支架的转染效率还需进一步提高,体内转基因阳性细胞的种类还需进行进一步鉴定,功能蛋白eNOS的表达和检测还需要进一步的研究.
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