工业微生物杂志文献阅读_Methanopyrus sp. SNP6源黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶序列分析及在大肠杆菌中的异源表达

Methanopyrus sp. SNP6源黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶序列分析及在大肠杆菌中的异源表达

潘俏俏; 裘娟萍; 余志良浙江工业大学生物工程学院; 浙江杭州310040

摘要：Methanopyrus sp.SNP6是一株极端嗜热产甲烷菌,本文将其黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶基因（fads）进行生物信息学分析并在大肠杆菌中加以表达。生物信息学分析发现,FAD合成酶由150个氨基酸残基组成,理论分子量为17 049.93,等电点为8.95;三级结构为同源二聚体,每个单体含有五股平行的（折叠,比典型的核苷酸结合折叠少一个β折叠。扩增fads基因,构建重组表达质粒p ET28b（＋）-fads,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。实验结果显示,该FAD合成酶能在大肠杆菌中高效表达,但部分蛋白以包涵体形式存在。本研究对Methanopyrus sp.SNP6源FAD合成酶进行了蛋白质序列和结构的分析,并首次实现了其在大肠杆菌中的稳定高效表达,为后续该酶的研究和开发提供了基础。

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