加急见刊

乌头霜霉病病原菌DNA提取方法初步研究

欧洪 李娜 徐小山 王光志 成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地 四川成都611137

摘要：目的：微量提取乌头霜霉病病原菌DNA,为专性寄生菌的DNA提取提供技术参考,为后续分子生物学实验的展开提供理论基础。方法：无菌毛刷刷取乌头霜霉病病原菌,用OMEGA真菌DNA提取试剂盒提取DNA,用真菌通用引物ITS4/5 PCR扩增。结果：此方法提取的乌头霜霉病病原菌DNA浓度均值为122ng/μL,A260/280均值为1.82,PCR扩增产物在500bp有明亮条带。实验成功提取出了乌头霜霉菌病原菌DNA。结论：此方法提取的DNA浓度及A260/280值均能满足后期实验要求,为后续分子实验提供保障。不同组织提取的DNA经PCR扩增比较后,能够初步得出乌头霜霉病病原菌的特异性片段,能为此类专性寄生菌的DNA提取提供基础。

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