加急见刊

逆转录重组酶介导扩增技术快速检测基孔肯雅热病毒

罗鹏; 姜梓凡; 郑伟; 吴忠华; 吕沁风; 郭利川; 应清界; 王刚 浙江国际旅行卫生保健中心; 杭州310012; 浙江省杭州高级中学; 杭州310000; 江苏齐天基因生物科技有限公司; 江苏无锡214135

摘要:本研究通过使用逆转录酶,将基孔肯雅热病毒RNA首先逆转录为cDNA。选取基孔肯雅热病毒保守序列设计引物及探针,建立基孔肯雅热病毒重组酶介导一步法等温核酸扩增RT—RAA(Reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)快速检测法,并分析其灵敏度及特异性。结果显示,该方法整个过程在39℃进行,检测时间短(〈20min),检测下限可达100copy,并与黄热病毒、日本乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、登革病毒I型等蚊媒病毒不存在交叉反应。本文建立的基孔肯雅热病毒RT—RAA检测法,灵敏度高、特异性强、操作简便,适应于口岸基层基孔肯雅热病毒的快速检测。

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