加急见刊

1,2-二氯乙烷通过线粒体通路诱导人星形胶质细胞凋亡研究

陈铿铿; 赖关朝; 曾丽海; 梁博萱; 钟怡洲; 陈念光; 黄曼琪; 郑杰蔚; 江亮; 林莉; 刘俊; 江俊莹; 郑倩玲; 黄振烈 广东省职业病防治院广东省职业病防治重点实验室; 广东广州510300; 中山大学公共卫生学院; 510275; 南方医科大学公共卫生学院食物安全与健康研究中心; 510515; 广东药科大学公共卫生学院; 510315

摘要：目的通过筛选细胞凋亡差异表达蛋白,探讨1,2-二氯乙烷（1,2-DCE）诱导人星形胶质细胞（HAs）凋亡的相关分子机制。方法以终浓度分别为0-80 mmol/L或0-40 mmol/L的1,2-DCE染毒HAs,培养24 h后,采用磷脂结合蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶流式细胞技术检测细胞凋亡,采用AAH-APO-1-2蛋白芯片筛选差异表达蛋白,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应（qRT-PCR）验证相关蛋白的差异表达基因。结果在1,2-DCE浓度为0-80 mmol/L时,随着染毒剂量增加,HAs细胞总凋亡率升高,呈剂量-效应关系（P〈0.01）。凋亡蛋白芯片筛选出7个差异表达蛋白,其中,与对照组比较,胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）-1、IGFBP-4和细胞色素C（Cyto C）表达均上调,P27、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2相互作用的细胞死亡中介物（BIM）和BH3交叉域死亡受体激动剂（BID）表达均下调。差异表达基因的qRT-PCR验证结果显示,40 mmol/L剂量组HAs中IGFBP-1、IGFBP-4和Cyto C的mRNA表达上调,与蛋白芯片的表达趋势一致;该组HAs中Caspase-3、BIM、BID的mRNA表达也上调。结论 1,2-DCE可能通过线粒体通路诱导HAs凋亡。

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