加急见刊

应用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白

王雪娟; 杨君; 张艳; 阎媛媛; 马峙英; 王省芬 河北农业大学教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室/农学院; 河北保定071001

摘要：前期研究表明海岛棉（Gossypium barbadense）GbVWR（Verticillium wilt resistance）基因参与了棉花抗黄萎病反应，但其抗病机制尚不清楚。本试验利用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白，并通过对互作关系的分析初步探讨其介导的棉花抗病机制。结果表明：本研究成功构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-GbVWR，并利用PEG/LiAc法将其转化至酵母菌株Y2HGold感受态细胞中，结果显示重组质粒无自激活活性及毒性；用携带诱饵载体pGBKT7-GbVWR的酵母菌株与黄萎病诱导的海岛棉Pima90-53酵母双杂交cDNA文库进行杂交，通过PCR、测序和数据库比对分析插入的基因片段，共筛选到24个与GbVWR潜在互作的蛋白，为进一步探明GbVWR的抗病功能提供了理论依据。

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