加急见刊

不同代昆明小鼠胚胎成纤维细胞的生长特性研究

黄悦; 严会文; 王燕燕; 苏敏 贵阳护理职业学院解剖学教研室; 贵州贵阳550081; 贵州医科大学组织学与胚胎学教研室; 贵州贵阳550081

摘要：目的分离培养昆明小鼠成纤维细胞,研究其体外生长特性并用于胚胎干细胞培养。方法消化法分离培养获得昆明小鼠胚胎成纤维细胞,利用MTT法绘制各代细胞生长曲线,免疫荧光对各代细胞进行细胞骨架分析;用不同浓度丝裂霉素C(10μg/mL、20μg/mL和30μg/mL)分别处理MEFs1、2、3h,MTT法筛选饲养层制备的最佳条件,制备饲养层用于小鼠胚胎干细胞的培养。结果分离的小鼠胚胎成纤维细胞3~5代细胞增殖能力较好;1~3代细胞微管微丝排列整齐,5代以后的细胞微管微丝排列紊乱;10μg/mL丝裂霉素C处理2h有利于小鼠胚胎干细胞的培养。结论体外分离培养的3~5代小鼠胚胎成纤维细胞可用于小鼠胚胎干细胞的培养。

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