灰毡毛忍冬的生药学研究

作者：税丕先，刘家奇，孙琴，庄元春

【关键词】 灰毡毛忍冬

摘要: 目的: 为灰毡毛忍冬的鉴别，开发利用提供依据。 方法: 采用来源、性状、显微、理化对其鉴别。 结果: 首次系统阐明了灰毡毛忍冬的生药学理论。 结论: 为制订灰毡毛忍冬质量标准提供依据。

关键词: 灰毡毛忍冬; 来源; 性状; 显微; 理化; 鉴别 The Study of Lonicera macranthoides Hand.┐Mazz's Pharmacognosy Abstract: Objective:In order to offering a basis for the differentiation and utilization of Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.Methods:Adopting its source and property，microscope，physical and chemical character to distinguish it.Results:Expounding the pharmacognosy theory systematically of the Lonicera macranthoides Hand.-Mazz for the first time.Conclusion:Offering basis on which make the Lonicera macranthoides Hand.-Mazz's quality standard Key words: Lonicera macranthoides Hand.-Mazz; Source; Property; Microscope; Physical and Chemical Character; Differention 灰毡毛忍冬是忍冬科忍科属木质滕本植物。常生于山谷溪 边，山坡或山顶混交林、灌木丛中，分布于湖南、贵州、四川、安徽等全国大部分地区，其花蕾及初开的花在四川、贵州、云南等省作金银花使用。由于含有较高的抗菌成分绿原酸，值得开发利用和收入国家药典。有关灰毡毛忍冬的生药学系统研究未见报道，我们对其进行了较为详尽的形态组织学与理化分析鉴别研究，以期为该药进入《中国药典》及进一步开发利用提供依据。

1 实验材料 灰毡毛忍冬采自四川古蔺县桂花乡林场，采集时间为2004-09-18，并经泸州市药品检验所张显副主任药师鉴定确认。

2 植物形态 木质滕体，茎紫褐色、黄褐色或黄棕色，有的被硬毛、中空、外皮易脱落。小枝具短糙毛，老枝蔗红色，无毛。叶革质、卵状披针形至宽披针形，长5～14cm，背面被短糙毛组成灰白色或灰黄色毡毛，微有黄色小腺毛，网脉突起呈网格状，脉上被糙毛，花序生小枝于顶端及叶腋;总花梗具短糙毛;苞片被毛、花冠长3.5～4.5（～6）cm，先白色后较黄色，连同萼齿外面均被倒生糙状伏毛和黄色腺毛，萼筒无毛或有时上半部或全部有毛。萼齿长三角形，外面和边缘均被短糙毛。见图1。 3 药材（花及花蕾）性状 花蕾长棒状，略弯曲，长1～5cm，上部稍膨大。表面棕绿色或棕黄色，密被倒生的短糙毛或微被腺毛，萼筒上半部有毛;萼齿五裂，被毛。开放者花冠二唇形，雄蕊5，黄色，雌蕊1，花柱无毛。气清香，味淡，微苦。

4 显微鉴别 花冠外表面显微观察，腺毛较少，腺头多圆盘形，侧面观6～18个细胞，排成1～3层，直径37～118μm，柄部2～5个细胞，厚壁非腺毛多短似角状，长21～240（～315）μm，体部直径8～20μm，壁厚3～10μm，表面微有疣状突起。见图2。 5 理化鉴别 5.1 仪器与试药

日本岛津LC-6A高效液相色谱仪;SPD-6AV可调波长紫外检测器，SCL-6A系统控制器;岛津C-R3A色谱处理机;RHEODYNE7125进样阀;B5200S超声波;TDZ4离心机;依特利LichrosordC18 （250mm×4.6mm，5μm），ODS-5填料;试剂均为国产分析纯。

5.2 薄层色谱鉴别

5.2.1 对照品

绿原酸，中国药品生物制品检定所，批号110753-200212。

5.2.2 薄层条件

硅胶板20cm×20cm;江苏福山生化试剂厂，用前活化1h。 5.2.3 样品溶液的制备及点样 取样品粉末0.1g，加甲醇5ml，冷浸12h，滤液作供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液。吸取供试液10～20μl，对照品液10μl分别点于同一硅胶H（含羧甲基纤维素钠）簿层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯（365）下观察 ［1］ 。 5.2.4 结果

供试液色谱中，在与对照品相同的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图3。 5.3 HPLC指纹图谱

5.3.1 对照易溶液的制备

精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成1ml含绿原酸0.168mg的溶液，即得。 5.3.2 供试液的制品 取供试品粉碎过30目筛，精密称取0.5g，加5%甲醇20ml，超声波提取1h，离心10min，取上清液，残留物用5ml甲醇洗涤，合并上清液，过滤，定容至25ml。 5.3.3 分离条件

色谱柱为依特利Lichrosord C18 （250mm×4.6mm，5μm）;柱温:30℃，流动相:甲醇-0.4%磷酸（38∶62）;流速:0.8ml/min;进样量:10μl;检测波长:325nm。

5.3.4 结果

取供试液进样，在325nm处测定，进行方法学考查，比较各共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积，结果基本一致，符合指纹图谱要求［2］ 。采用相对保留时间标定共有指纹峰，以图谱中绿原酸为参照物（S），将各指纹峰保留时间与同一图谱中参照物保留时间比较，其比值为各指纹峰的相对保留时间。灰毡毛忍冬药材的共有指纹峰为5个，见图4。 6 讨论 6.1 金银花品种中对忍冬的研究较多，而对灰毡毛忍冬的系统研究未见报道，本文对灰毡忍冬指纹图谱进行了初步检测，进一步深入的研究尚在进行中。 6.2 灰毡毛忍冬绿原酸含量较高，随着金银花用量的增加，原药典品种不能满足市场需要。有关方面应加紧灰毡毛忍冬的基础研究，争取早日成为药典收载品种。

［2］ 国家药品监督管理局.中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）［J］.中成药，2000，22（10）:671-671.