生地降糖胶囊对糖尿病小鼠的药效学研究

作者：赵培西， 谢艳华， 王剑波， 李慧， 沈薇， 贺中民， 王四旺

【关键词】 生地降糖胶囊；，，糖尿病；，，四氧嘧啶；，，小鼠；，，血糖

摘要：目的研究生地降糖胶囊对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖、体质量及血脂的影响。方法小鼠以60 mg/kg尾静脉注射四氧嘧啶生理盐水溶液造成糖尿病模型，形成糖尿病模型后随机分为6组，连续i.g.给予生地降糖胶囊21 d，观察用药前后小鼠的一般情况，每7 d给药后4 h眼后静脉丛采血，分别测定血糖、总胆固醇和甘油三酯含量。结果生地降糖胶囊能明显改善糖尿病小鼠的精神状况，增加小鼠体质量(P<0.001)；给药7 d后，大、中剂量组对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠即有明显的的降血糖作用(P<0.01)；给药21 d后，大、中剂量组有缓和的降低总胆固醇、甘油三酯含量的作用(P<0.05)。结论生地降糖胶囊具有降血糖、增加糖尿病小鼠体质量和调节血脂的作用。

关键词：生地降糖胶囊； 糖尿病； 四氧嘧啶； 小鼠； 血糖

现代医学所称糖尿病，中医文献中虽然无此病名，但就其临床所见症状和体征，可归属于“消渴”范畴。生地降糖胶囊是在传统古方地黄牛膝丸的基础上经过现代科学工艺研究而成的6类新药［1，2］。本方由生地黄和怀牛膝两味药组成，采用的地黄为玄参科多年生草本植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根和同为河南产的苋科植物牛膝Achyranthes bidentata Bl.的根。地黄是治疗“消渴”的经典中药之一，如六味地黄丸等。地黄中主要的降血糖成分有梓醇、地黄低聚糖(ROS)等。有文献报道［3］ROS i.g.给药100 mg/kg对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠有良好的降血糖作用。

1 材料与仪器

1.1 药品与材料生地降糖胶囊由中国人民解放军第四军医大学药学系药物研究所植物化学实验室提供，批号20050408；糖脉康颗粒，成都中汇制药有限公司，批准文号：国药准字Z10970026，产品批号：050602；格列本脲片(优降糖)，山东博山制药有限公司，批准文号：国药准字H37021769，产品批号：040029；四氧嘧啶(Alloxan)，美国Sigma化学公司出品，批号：A7413，Lot122H33211。葡萄糖试剂盒，产品注册号：国食药监械(准)字2004第3400196号，批号：240131；胆固醇试剂盒，产品注册号：国食药监械(准)字2004第3400202号，批号：251131；甘油三酯试剂盒，产品注册号：国食药监械(准)字2004第3400198号，批号：220231，试剂盒均由中生北控生物科技股份有限公司生产。

1.2 仪器日立KY2000 clinical Spectrophotometer半自动生化分析仪，型号：16F0010，批号：NO.1602006；TDZ 5.40多管架自动平衡离心机，湖南仪器仪表总厂兴华仪器厂；DT2000电子天平，(86)量制京字00000137，北京医用天平厂；琴岛LIEBHERR冰箱，型号：BD184。

1.3 动物昆明种小鼠276只，体质量为17～23 g，由中国人民解放军第四军医大学实验动物中心提供，质量合格证号：医动字第05236号。

1.4 饲养环境每组6~8只分笼饲养于IVC系统内，室温(24±2)℃，相对湿度40%~60%，人工控制昼夜各12 h，供以标准鼠饲料，自由饮水，换垫料1次/d。

2 方法

2.1 模型建立取昆明种小鼠276只，雌雄各半，在实验动物室适应48h。禁食不禁水4 h后，称体质量作标记。从中随机留取48只作为正常对照组，雌雄各半。剩余正常昆明种小鼠禁食不禁水12h后，尾静脉注射0.6% Alloxan 60 mg・kg1（临用前用生理盐水配制）［4］，72 h后禁食不禁水4 h，机抽取造模和正常小鼠各12只测血糖值，观察造模情况。

2.2 药物配制生地降糖胶囊药粉配成3.8%，1.9%，0.95%大、中、小3个剂量的供试药液。糖脉康颗粒配成19.5%供试药液。格列本脲片(优降糖)配成0.05%供试药液。

2.3 分组、给药与指标检测将观察造模后剩余的216只Alloxan糖尿病小鼠，随机分为6组，每组36只(12×3组)，分别为：模型组、糖脉康颗粒组(3.9 g/kg)、优降糖组、生地降糖胶囊大、中、小剂量组(0.78，0.39，0.195 g/kg)。每组12只，雌雄各组均分。模型组ig10 ml/kg蒸馏水，各给药组均ig 1 ml/kg供试药液。每日9：00左右ig给药，连续3 d，每3天后称体质量，记录称重结果，按新体质量调整药量。每7天随机抽取每组12只，雌雄各半，眼眶静脉丛采血后处死，血浆在4℃冰箱保存2 h促凝，分离血清20℃冻存。以葡萄糖氧化酶法测定血糖。直至给药第21 天后眼眶静脉丛采血后全部处死。用半自动生化分析仪测定各时间点血糖(GLU)，测定第21 天时总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。

2.4 统计学处理结果以 ±s表示， 进行组间t检验，采用SPSS10.0。统计学软件进行统计分析。

3 结果

3.1 观察造模的结果实验结果表明，与正常组小鼠比较，模型组小鼠血糖值明显升高(P<0.001)，说明模型制备成功。结果见表1。

3.2 对血糖的影响各造模组与正常组小鼠比较血糖值均显著升高(P<0.001)，说明模型稳定可靠。给药后第7天生地降糖胶囊大、中剂量组和优降糖组与模型组比较血糖明显下降(P<0.05)。第14天生地降糖胶囊大、中、小剂量组和糖脉康颗粒组及优降糖组血糖值均降低，与模型组比较，具有明显统计学意义(P<0.05)，其中大、中剂量组和优降糖组有显著的降血糖作用(P<0.001)。给药后第21天生地降糖胶囊大、中、小剂量组和优降糖组血糖值均降低，与模型组比较具有显著的统计学意义(P<0.001)。结果见表2。

3.3 对体质量的影响生地降糖胶囊大、中、小剂量组和糖脉康颗粒组对动物体质量的影响与模型组比较有明显差异(P<0.05，0.001)。结果见表3。

3.4 对血脂的影响造模后21 d甘油三酯已有明显升高(P<0.001)，但总胆固醇升高不明显，生地降糖胶囊大剂量组能明显降低甘油三酯含量(P<0.01)，同优降糖一致，中剂量组则有缓和的调节甘油三酯作用，结果见表4。

表1 四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠模型结果（略）

模型组与正常组比较，△△△P<0.001

表2 生地降糖胶囊对糖尿病小鼠血糖的影响（略）

与正常组比较，△△△P<0.001; 与模型组比较，**P<0.05，***P<0.001

表3 生地降糖胶囊对糖尿病小鼠体质量的影响（略）

与正常组比较，△△P<0.01，△△△P<0.001；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001

表4 生地降糖胶囊对糖尿病小鼠血清胆固醇和甘油三酯的影响（略）

与正常组比较，△△△P<0.001；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

4 讨论

糖尿病祖国医学称为“消渴”范畴，其发病机制是燥热伤阴，导致阴津亏耗。总的治疗大法是滋阴清热，润燥生津。生地降糖胶囊是根据这一原理在传统古方基础之上经过现代工艺研制而成的新制剂，其功用为养阴生津，活血化瘀。糖尿病病人由于糖代谢紊乱造成高血糖，由于脂肪代谢紊乱表现有高血脂症，对生地降糖胶囊的实验研究显示，四氧嘧啶诱发小鼠产生糖尿病，甘油三酯已有明显升高，但总胆固醇升高不明显，这与文献报道一致［5］。生地降糖胶囊对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠有降低血糖、增加糖尿病小鼠体质量和调节血脂的作用，其降血糖作用可能与生地黄中的梓醇和ROS有关，调节血脂的作用可能与怀牛膝的活血化瘀有关，而血脂的降低有助于预防糖尿病并发症的发生。该作用可能是血糖降低后，间接改善脂代谢所致，但有无直接作用尚不能确定，有待进一步实验研究。

［1］ 明・李时珍.本草纲目，第1册［M］.北京：人民卫生出版社，1977：475.

［2］ 赵培西，王四旺，王剑波. 牛膝中齐墩果酸提取工艺研究［J］.陕西中医，2005，26(10)：1099.

［3］ Ruxue Zhang， Jinhuang Zhou， Zhengping Jia，et al. Hypoglycemic effect of Rehmannia glutinosa oligosaccharide in hyperglycemic and alloxan-induced diabetic rats and its mechanism［J］. Journal of Ethnopharmacology.2004， 90，30.

［4］ 徐叔云，卞儒廉.药理实验方法学，第2版［M］.北京：人民卫生出版社，1991：1277.

［5］ 蒋国彦.实州糖尿病学［M］.北京：人民卫生出版社，1992：258.