黑曲霉脂肪酶tglE的基因克隆与生化特征解析
摘要：从黑曲霉基因组中克隆了一种新的脂肪酶基因tglE,并在毕赤酵母中成功表达。重组酶具有典型的脂肪酶活性,其最适pH为7.0,最适温度为40℃;在30~60℃或pH 6.5~9.0该酶的酶活力保持在60%以上;在pH 6.0~8.0或20~30℃均较为稳定。Cu^2+、Mn^2+、Ca^2+、K^+、Mg^2+和Sn^2+对tglE有明显的激活作用;Fe^3+、Zn^2+和EDTA对重组酶的酶活抑制作用明显,特别是EDTA可抑制重组酶90%的活。tglE对橄榄油和C 4底物的作用最强,对棕果油和C 16底物的作用最弱。以C 4为底物,tglE的K m值为14.40 mmol/L,V max为46.72 mmol/(mL·h)。tglE具有催化辛酸和乙醇生成辛酸乙酯的酯化活性。
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