两种培养基方法对医院环境监测结果的比较

【摘要】 目的探索简便实用的采样与检测方法。方法用普通营养琼脂和羊血营养琼脂两种平板对医院环境空气进行沉降采样检测，并进行比较。结果用普通营养琼脂平板进行采样和检测，细菌总数超标率为15.3%，未检出金黄色葡萄球菌;用羊血营养琼脂平板进行采样和检测，细菌总数超标率为12.9%，检出金黄色葡萄球菌4株。细菌总数超标率两者间无统计学意义(χ2=6.81，P<0.05)。结论用羊血营养琼脂平板对医院环境空气进行检测，结果优于用普通营养琼脂平板进行监测。

【关键词】 普通营养琼脂;羊血营养琼脂;细菌总数;金黄色葡萄球菌

为了探索简便易行且实用的采样与检测方法，在监测中，按消毒技术规范[1-2]，用普通营养琼脂平板和羊血营养琼脂平板同时布放采样[3]，对细菌菌落总数和致病菌的检测结果进行了比较观察。

1资料与方法

1.1一般资料：

对市内6家大小医院的环境空气分别用普通营养琼脂和羊血营养琼脂进行沉降法布点采样，经过37℃ 48h培养，其监测结果指数为菌落总数和金黄色葡萄球菌。

1.2平板的制备：

将灭菌后的普通营养琼脂加热溶化冷至45℃左右倾注平皿，每板17ml左右，冷却后即得普通营养琼脂平板。将冷至45℃左右营养琼脂，按每100ml加入10ml脱纤维羊血，混匀后倾注平皿，每皿17ml左右，冷却后即得羊血营养琼脂平板。将制备好的平板翻转放入37℃培养箱过夜，弃去长菌的平板，未长菌的平板用灭菌纸包好，放4℃-8℃冰箱备用(放置时间不得超过1周)

1.3采样方法[1]：

室内面积<30m2，设内、中、外对角线3点布放，室内面积≥30 m2，设4角及中央5点布放，各点距地面1.5m，将普通营养琼脂平板和养血营羊琼脂平板同时放于上述各点，打开平板盖，空气中暴露5min后盖好平板盖，用灭菌纸包好立即送检。

1.4检验：

将送检样品放入37℃温箱内培养48h后，计数各个平板的菌落总数，同时进行致病菌的检测，按下式计算菌落总数:细菌菌落总数(cfu/m3)=50000N/A×T。式中A为平板的面积(cm2)，T为暴露时间(min)，N为平均菌落数(cfu)。

1.5评价标准：

Ⅰ类区域：细菌总数≤10 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌为消毒合格;Ⅱ类区域: 细菌总数≤200 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌为消毒合格;Ⅲ类区域: 细菌总数≤500 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌为消毒合格。

2结果

2.1监测结果：

普通营养琼脂平板检测样品340份中，细菌菌落总数超标52份，未检出金黄色葡萄球菌。羊血营养琼脂平板监测样品340份中，细菌菌落总数超标44份，超标率为12.9%，检出金黄色葡萄球菌4份。两组琼脂平板比较，χ2=0.776，P>0.05，说明细菌总数超标率两者之间差异无统计学意义，致病菌检测结果两者间差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2平均菌落数区间分布的样品比例数：

两者在平均菌落数各区间分布的样品比例数无统计学意义(χ2=6.81，P>0.05，表1)。表1两种平板平均菌落数区间分布样品比例的比较

3讨论

检测结果表明，用普通营养琼脂平板和羊血营养琼脂平板同时对医院环境空气各监测340份，细菌总数前者超标为52份，后者超标为44份，两者无统计学意义。从平均菌落数在≤1 cfu/平板至>5 cfu/平板各区间分布的样品比例数来看，各区间分布的样品比例数也无统计学意义。前者未检出金黄色葡萄球菌，后者检出4株金黄色葡萄球菌。由于金黄色葡萄球菌在普通营养琼脂平板上生长无特征性，要鉴定就要逐个菌落进行，这样工作量大，浪费时间，难免遗漏，而在羊血营养琼脂平板上的生长都有特征性的溶血环产生，能准确判定可疑菌落并进行鉴定，省时省力，提高检出率。在实际工作中用后者替代前者采样，不但省时省力，提高工作效率，而且在布放平板时还可减少对被测环境空气的搅动，使结果更准确。因此，采用羊血营养琼脂平板对医院环境空气进行监测，其细菌总数检测结果与采用普通营养琼脂平板检测结果差异无统计学意义，而对致病菌的检测其结果明显优于普通营养琼脂平板。