黄芪增免散对围手术期食管癌组织Langerhans细胞的影响

【摘要】 目的 观察黄芪增免散对围手术期食管癌组织Langerhans细胞(LC)的影响。方法 采用黄芪增免散治疗围手术期食管癌患者36例，观察手术切除食管组织内LC的变化及形态特征。结果 与对照组比较，服药组食管癌组织内LC显著增多（P<0.05），且与癌细胞密切接触，反映对癌细胞杀伤作用增强。随着肿瘤分化程度降低，浸润深度增加，LC及间质淋巴细胞数量明显减少（P<0.01），显示肿瘤对机体免疫功能的损害。结论 围手术期食管癌患者免疫调节治疗可改善细胞功能。

【关键词】 黄芪 Langerhans 细胞 免疫功能

Influence of Astragalus Mongholicus Misture on Langerhans Cells in Tissue of Esophageal Carcinoma During Period of Operation

Key words：Astragalus mongholicus; Langerhans cell; Immune function

研究证实，肿瘤的发生、治疗、预后和康复与机体免疫状态都有密切关系。因此，维持一个良好或健全的免疫状态对于机体抵御肿瘤的侵袭和危害以及肿瘤患者的生存和生活质量都至关重要。近年来临床中医采用“扶正祛邪”药物辅助治疗恶性肿瘤，对于提高机体免疫功能有独到之处，本文应用黄芪增免散治疗围手术期食管癌患者36例，观察其对食管癌组织内Langerhans细胞(LC)的影响。

1 资料与方法

1.1 资料来源 54例食管癌患者，术前均经纤维胃镜活检，病理诊断为食管鳞癌，随机分为两组，服药组36例，男24例，女12例，年龄35～72岁，平均58.84岁。对照组18例，男11例，女7例，年龄43～75岁，平均57.4岁。两组均行食管癌根治切除术。每例于癌中心取材1块，癌旁四周1cm处取材4块，每块1cm×1cm×0.5cm，10%缓冲福尔马林固定制成蜡块。切片厚4μm，贴片4张，分别做HE染色及S100蛋白ABC免疫组化染色，两组在年龄、性别、治疗方法、病理分级等方面均无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2 药物用法及观察指标

1.2.1 药物用法 增免散配方由红参、黄芪、枸杞子、女贞子、肉苁蓉等组成，按1∶5∶2∶2∶2比例配方，称重后烘干(60℃～70℃)。粉碎后过120目筛，混匀即成药粉，于术前一周服用黄芪增免散，每次10g，每天3次；水煎服，术后1周，继续水煎剂口服或灌胃，总疗程4周。对照组未用中药，其他治疗方法均与服药组相同。

1.2.2 观察指标 光镜观察癌细胞分化程度、浸润深度及间质淋巴细胞浸润情况，详细观察LC细胞的形态分布，并通过油镜观察LC与肿瘤细胞之间的关系，每张切片挑选10个阳性细胞较密集的高倍视野，每个视野计数100个细胞并计算阳性细胞的数量，求其算术平均值，将(0～2)/H定为(+)，将(3～4)/H定为(++)，>5/H定为(+++)。癌组织内LC细胞，散布为(+)，呈灶状聚集为(++)，生发中心形成定为(+++)。

1.3 统计学处理 采用χ2检验。

2 结果

2.1 两组LC细胞数量及形态比较 S100阳性LC为棕黄色，其胞浆及胞核均呈阳性反应，胞核清楚，核仁不明显，对照组LC胞体较小，胞突少而细长，见图1、2。服药组LC胞体多较大，分支较多，短而细，多呈丛状，在癌组织中LC散在分布、镶嵌于癌细胞之间，以坏死区、癌巢周边较多，癌间质内淋巴细胞浸润较多且呈灶状聚集处LC相对较多，可见一些LC细胞延伸至癌细胞之间，并见部分LC胞突与癌细胞密切接触，也可见LC与淋巴细胞互相伴随，其胞突包绕细胞，见图3、4。两组观察发现，服药组LC在癌组织内数量明显多于对照组，两组比较P<0.05，见表1。表1 食管癌组织LC细胞检测结果χ2=6.03，P<0.052.2 LC与各观察指标之间的关系 通过定量观察发现，肿瘤组织内LC和淋巴细胞数量与癌组织浸润深度及分化程度有密切关系，随着肿瘤分化程度降低，浸润深度增加，LC及淋巴细胞数量显著减少(P<0.01)，见表2。

3 讨论

许多研究已证实，恶性肿瘤患者外周血中NK细胞、B细胞、T细胞及巨噬细胞均有不同程度降低。S100蛋白阳性LC是骨髓来源的树突状细胞，能刺激同种系的T细胞增殖，为主要的抗原递呈细胞，在细胞介导的抗肿瘤反应中充当重要角色，在激活或辅助细胞转化为具有攻击的淋巴细胞或具有合成、分泌抗体的浆细胞的过程中有重要作用［1］。表2 食管癌组织病理学检测结果

观察指标nLC+++χ2P分化程度 高28424中1578低11101 21.31<0.01浸润深度 粘膜下12111肌层341321外膜880 18.93<0.01淋巴细胞 散在322111聚集22121 19.48<0.01

本组结果显示，LC数量、形态、分布与食管癌组织分化程度、浸润深度及淋巴细胞浸润等方面有密切关系，随着癌细胞分化程度降低、浸润深度增加，LC及间质淋巴细胞浸润趋势减少，可能系恶变细胞产生免疫抑制因子，广泛抑制机体免疫杀伤细胞群的活性［2］，恶变细胞分化越低、浸润越深、其免疫抑制作用越强，LC数量及淋巴细胞浸润现象越少，从形态学角度反映肿瘤对机体免疫损害。手术根治性切除是治疗肿瘤有效方法，可解除肿瘤对机体细胞免疫功能抑制作用，但手术创伤亦会抑制机体的免疫功能，而对于不能根治切除肿瘤的手术创伤为术后机体残存肿瘤的蔓延与扩散提供机会。因此，开展对肿瘤患者围手术期免疫功能的动态监测及免疫调节治疗具有重要意义［3］。

国内外有研究表明，中药黄芪含有一种叫AAG的多糖，该多糖可作用于人体的二级免疫组织(一级免疫组织胸腺已退化)中的免疫调节细胞，一是通过分泌造血因子GMCSF、GCSF和IL6促进造血，增加免疫细胞的数量，二是分泌不同的细胞因子（IL12和IL10）调节不同功能免疫细胞(Th细胞)的分化和功能表达以及NK细胞的活性［4］。增免散以黄芪为主配方，其中黄芪、枸杞子、女贞子、红参等有效成份为中药多糖，是一类重要的免疫反应调节剂［5］，起到“补五脏，益气血，滋补强壮”之功效，“正气存内，邪不可干”，有利于机体免疫功能的恢复和增强［7］。术后病理组织学观察发现，服药组手术切除癌组织内S100蛋白阳性LC数量明显高于对照组(P<0.05)，见LC胞突延伸至癌细胞之间与癌细胞密切接触，也可见LC与淋巴细胞互相伴随现象。此结果显示，中药黄芪等多糖类物质对激活局部免疫活性细胞的免疫杀伤功能有一定作用。通过围手术期食管癌免疫调节治疗，可望改善机体免疫状态，增强对手术的耐受力，提高手术治愈率，延长患者生存期。

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