清咽排毒颗粒的药效学研究

【摘要】 目的研究清咽排毒颗粒在解热、镇痛、抗炎、止咳、祛痰、体外抗菌、体外抗病毒等方面的作用，为其临床用于风热型急性咽炎提供了实验依据。方法选用2，4二硝基苯酚致大鼠发热法、热板法、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀法、氨水引咳法、小鼠酚红排泄法、最低抑菌浓度法和鸡胚内抗病毒法。结果清咽排毒颗粒对2，4二硝基苯酚所致大鼠发热有显著的解热作用；对热板法引起的疼痛具有明显的镇痛作用；对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用；能明显抑制氨水引起的小鼠咳嗽，促进小鼠气管酚红排泄；对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、甲型流感病毒H1N1有一定抑制作用。结论清咽排毒颗粒具有解热、镇痛、抗炎、止咳、祛痰、体外抗菌、体外抗病毒等方面的作用。

【关键词】 清咽排毒颗粒； 解热； 镇痛； 抗炎； 止咳； 祛痰； 抗菌； 抗病毒

Abstract：ObjectiveTo study the pharmacodynamic actions of Qingyan Paidu Granule about antipyretic， analgesic， anti-inflamatory， antitussive， expectorant， bacteriostasis， and antivirus. MethodsAntipyretic action was evaluated with rat pyrogentic test induced by 2，4-dinitrophenol. Its analgesia action was investigated by hot plate test. Anti-inflammation action by using auricle swelling in mice caused by bimethylbenzene and antitussive effect by using cough-model in mice caused by ammonia were observed and the quantity of phenolred secreted from the mice's trachea were determined. Minimal inhibitory concentration test and antiviral effect by infecting chicken embryo with H1N1 were tested. ResultsQingyan Paidu Granule had obvious antipyretic action， analgesic action， anti-inflammationy action， antitussive action， and expectorant action; and it had some inhibitory action to staphylococci， beta-hemolytic streptococci， pneumococcus， Escherichia coli， and influenza virus A with H1N1. ConclusionQingyan Paidu Granule has evident effects of antipyretic， analgesia， anti-inflammation， antitussive， expectorant， bacteriostasis， and antivirus.

Key words：Qingyan Paidu Granule; Antipyretic; Analgesia; Anti-inflammation; Antitussive; Expectorant; Bacteriostasis; Antivirus

清咽排毒颗粒是由金银花、野菊花、紫花地丁、牛蒡子、青蒿、牡丹皮、玄参、薄荷、甘草等组成的中药复方制剂。主要用于风热型急性咽炎引起的咽干灼热、咽痛、发热恶寒、咳嗽咳痰。为了给临床上的应用提供理论上的依据，笔者对其进行了药效学方面的研究。

1 材料

1.1 药物清咽排毒颗粒，由广州中医药大学提供，2 g/包，批号20050402。利巴韦林片，由山东鲁北药业有限公司提供，20 mg/片，批号010815；阿司匹林，由石家庄神威药业股份公司生产，批号990912；消炎痛，由中山市三才医药集团有限公司生产，25 mg/片，批号200408156；醋酸泼尼松片，由广东华南药业有限公司生产，5 mg/片，批号641011；磷酸可待因片，为北京中顺制药厂生产，批号020412；沐舒坦盐酸氨溴索片，为上海勃林格殷格翰药业有限公司生产，批号484031。

1.2 菌株甲型流感病毒H1N1（A1京防86-1），中国预防医学科学院病毒学研究所提供；金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、乙型溶血性链球菌(NICBP32210)、肺炎克雷伯氏菌（ATCC13883）和大肠杆菌（O111B4），购自中国药品生物制品检定所。

1.3 动物SD大鼠

（医动字第0007724）、NIH小鼠（医动字第0005366号），由广州中医药大学实验动物中心提供。

2 方法与结果

2.1 解热作用实验

选用体温波动不超过0.2 ℃的大鼠50只，雌雄各半，随机均分为5组（n=10），分别测肛温2次，间隔30 min，以均值作为其正常体温。药物组分别灌服清咽排毒颗粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，阳性对照组灌服阿司匹林0.1 g·kg-1，空白对照组灌服等体积蒸馏水。一次给药后随即对大鼠背部皮下注射2 %的2，4二硝基苯酚15 mg·kg-1，并于给药后30，60，120，180，240 min测其肛温，结果进行t检验，见表1。表1 清咽排毒颗粒对2，4二硝基苯酚所致大鼠发热的影响（略）

2.2 镇痛作用实验 将体重在(20±2)g的雌性小鼠置于(55±0.5)℃的金属板上，以小鼠舔后足为疼痛反应信号，以疼痛反应潜伏期为痛阈指标，给药前测两次(间隔5 min)，以其均值作为基础痛阈，选择痛阈值在5～30 s的小鼠50只，随机均分为5组（n=10）。药物组分别灌服清咽排毒颗粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，阳性对照组灌服消炎痛8.33 mg·kg-1，给药1次/d，连续3 d；空白对照组灌服等体积蒸馏水。于末次给药后1 h测痛阈值两次(间隔5 min)，取平均值，计算前后痛阈值之差，即痛阈提高值，t检验。结果见表2。

2.3 抗炎作用实验

选用体重在（20±2）g小鼠50只，雌雄各半，随机均分为5组（n=10）。药物组分别灌服清咽排毒颗粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，阳性对照组灌服消炎痛8.33 mg·kg-1，给药1次/d，连续3 d；空白对照组灌服等体积蒸馏水。于末次给药后30 min，每鼠左耳涂以100%二甲苯0.02 ml。1 h后颈椎脱臼处死动物，剪下双耳，用打孔器在相同部位打下耳片，称重，以重量差异值作为肿胀程度，t检验分析。结果见表2。表2 清咽排毒颗粒对热刺激所致小鼠疼痛及二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（略）

2.4 止咳作用实验

选用体重在(20±2)g小鼠50只，雌雄各半，随机均分为5组（n=10）。药物组分别灌服清咽排毒颗粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，阳性对照组灌服磷酸可待因30 mg·kg-1，给药1次/d，连续5 d；空白对照组灌服等体积蒸馏水。于末次给药后30 min，将动物置于雾化器内，以53kpa恒压将氨水均匀喷雾15 s，观察小鼠的咳嗽潜伏期和3 min内咳嗽次数（以小鼠腹肌收缩并张大口为咳嗽动作指征），结果进行t检验分析。结果见表3。表3 清咽排毒颗粒对小鼠咳嗽潜伏期的影响（略）

2.5 祛痰作用实验［1］

选用体重在（20±2）g小鼠50只，雌雄各半，随机均分为5组（n=10）。药物组分别灌服清咽排毒颗粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1；阳性对照组灌服沐舒坦盐酸氨溴索片30 mg·kg-1，空白对照组灌服等体积蒸馏水。给药1次/d，连续4 d。小鼠禁食16 h，于末次给药后30 min，腹腔注射0.5%酚红溶液0.5 ml， 30 min后颈椎脱臼处死小鼠，分离气管，气管插管并与注射器相连，用5 %NaHCO3溶液冲洗气管3次，0.5 ml/次，合并冲洗液，用上述NaHCO3溶液定容至3 ml。2 000 r/min离心5 min，得到红色上清液，用722分光光度计，波长545 nm测OD值，根据酚红的标准曲线计算酚红的排泄量。结果进行t检验，见表3。

2.6 体外抗菌实验［2］

将金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌活化，挑选典型菌落，接种在M－H肉汤管中，置37 ℃孵箱内培养24 h，并用无菌生理盐水稀释成含菌量约为1×107 CFU·ml-1浓度待用；取M－H琼脂加热溶化，采用琼脂二倍稀释法加入药液（0.22 μm微孔滤膜滤过），混合均匀，倾注于平皿，做成含不同浓度的琼脂平皿；用接种环取上述稀释菌液一环，接种于含药物琼脂平板，置37 ℃孵箱中培养24 h，观察结果。以无菌生长的平皿中所含最低药物浓度作为药物的最低抑菌浓度（MIC）。结果见表4。表4 清咽排毒颗粒对常见致病细菌在体外的抑制作用（略）

2.7 体外抗病毒实验选择

生长良好的10日龄活鸡胚，随机均分为4组。药物实验组设3个浓度（140，70，35 mg/ml），分别取2 ml接种至鸡胚尿囊腔；阳性药物组取利巴韦林（100，50 mg/ml）0.2 ml接种至鸡胚尿囊腔；病毒对照组接种生理盐水0.2 ml；正常鸡胚对照组接种生理盐水0.3 ml。接种药物后再接种100 EID50流感病毒液0.1 ml。鸡胚注射完毕后，均用溶化的石蜡封闭注射孔，置35 ℃温箱中培养，检视2次/d，24 h内死亡者弃去，至48 h，将存活的鸡胚移至4 ℃冰箱过夜，次日分别收集鸡胚尿囊液，用0.5 ％鸡红细胞进行定性和定量血球凝集试验。将各给药组的鸡胚尿囊液血凝测定（HA）实验结果与病毒对照组进行比较。结果显示，140，70 mg·ml-1浓度的清咽排毒颗粒对100 EID50流感病毒H1N1有明显的抑制作用。

3 讨论

以上实验结果表明，清咽排毒颗粒不同剂量组对2，4二硝基苯酚所致大鼠发热均有显著的解热作用；高、中剂量组对热板法引起的疼痛具有一定的镇痛作用；对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用；能明显抑制氨水引起的小鼠咳嗽，促进小鼠气管酚红排泄；对金黄色葡萄球菌杀菌效应最高，对肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌作用较弱；高、中剂量组对甲型流感病毒H1N1有一定抑制作用。因此，清咽排毒颗粒可用于风热型急性咽炎，具有良好开发前景。

清咽排毒颗粒是由金银花、野菊花、紫花地丁、牛蒡子、青蒿、牡丹皮、玄参、薄荷、甘草等多味中药组成，其中多味药材含挥发性有效成分，如金银花、野菊花、紫花地丁、薄荷，故在进行体外抗菌、抗病毒实验时不宜进行高压消毒，宜采用0.22 μm微孔滤膜滤过。同样，在进行其它实验时，应随用随配，从而保证药效的发挥。