血康口服液膜分离工艺的正交设计及药效学研究

作者：余华， 朱才庆， 朱良辉， 李艳， 徐丽瑛， 魏东芝

【关键词】 血康口服液；，，膜分离；，，药效，

摘要：目的：探讨膜分离血康口服液时不同膜组件及操作参数对膜分离效果的影响。方法：采用不同截留分子的膜组件、操作参数的正交设计，以与异嗪皮啶相关的各种指标考察不同膜组件及操作参数对膜分离效果的影响。结果：截留分子量为20KD的PS膜具有较好的膜分离效果，选择压力0.08MPa、料液温度40℃、进料流速2.8 L/min的操作参数工作效率更高，但对干膏中的异嗪皮啶含量及其膜透过率没有显著性影响。结论：膜类型和操作参数对血康口服液膜分离效果有影响，新工艺制备的药液色泽好、澄清度大为改善，且具有良好的药效作用。

关键词：血康口服液； 膜分离； 药效

Study on Orthogonal Test of Preparing Xuekang Oral Liquid by Membrane Technology and its Drug Function

Abstract:Objective:To evaluate the different membranes and its selection of operation parameter on membrane separation efficiency of Xuekang oral liquid.Methods:Basing on the index related to the total flavonoids reserved in liquid， to investigate effect of the different aperture membrane and orthogonal test of separation parameters on membrane separation efficiency of Xuekang oral liquid.Results:The PS membrane with 20KD interception molecular weight had better separation efficiency， and the preferred operation parameters were 0.08 MPa of pressure and 40℃ of liquid temperature and 2.8 L/min of liquid speed， but they had no significant effect on isofraxidin content in dissoluble material and ratio of isofraxidin penetrating membrane.Conclusion:Xuekang oral liquid prepared by new membrane separation technology was clear and had good colour and functioned very well.

Key words:Xuekang oral liquid; Membrane Separation; Drug Function 血康口服液是由草珊瑚（Sarcandra glabra）单味药组成中药制剂。它具有活血化瘀、消肿散结、凉血止血的功效，在临床上可用于血热妄行、皮肤紫斑、原发性及继发性血小板减少性紫癜等疾病的治疗［1，2］。传统水提醇沉法除了存在流程长、成本高、产品粘度大、色泽深不足外，在长期放置过程中会产生絮凝物，影响产品质量和安全性。因此，利用现代分离技术改造传统工艺具有十分重要的实际应用价值。 膜分离技术具有常温操作、无相变、能耗低等其它分离纯化手段无法比拟的优点，在中药制药中的应用目前有许多报道［3～7］，然而成功应用于实际生产的不是很多，其主要问题是中药成分相当复杂，易造成膜堵塞、通量不高、有效成分损失大、使用寿命降低等。因此，在膜分离前对中药药液进行预处理是十分重要的。本文报道预处理后膜类型和操作参数对膜分离血康口服液的效果影响和药效作用的研究。

1 材料

1.1 实验仪器中空纤维超滤装置及膜组件（天津膜天膜工程技术有限公司TP 1020型）；百万分之一电子天平（瑞士Mettler公司M3型）；高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂GL20B型）；紫外可见分光光度计（美国PerkinElmer公司Lambda 12型）；高效液相色谱仪（大连依利特分析仪器有限公司）。

1.2 试剂异嗪皮啶对照品（中国药品生物制品检定所），血康口服液（江西天施康中药股份有限公司提供，批号20030301），注射用盐酸阿糖胞苷（上海华联制药有限公司）。

2 方法与结果

2.1 膜类型的选择超滤膜的选择包括截留分子量和膜材质的选择两个方面，这两方面都是影响膜分离效果的主要因素。血康口服液质量控制指标之一是异嗪皮啶含量，因此在本研究中主要监测与异嗪皮啶相关的一些指标。系统研究表明微滤是血康口服液较好的预处理方法。预处理后，在本研究中首先对不同截留分子量的膜对血康口服液的分离效果进行了考察。结果见表1。其中膜设备的操作参数为：压力0.08 MPa、温度25℃、进料流速2.8 min/L，初始药液体积为1 000 ml，异嗪皮啶含量为0.121 mg/ml。由表可知，分离相同体积的药液时，随着膜截留分子量的增加，异嗪皮啶透过率增加，运行时间缩短，平均膜通量上升，透过液的色泽也加深，而干膏中的异嗪皮啶含量以截留分子量为20KD的UPIS503型膜组件的最高。另外在实验过程中发现截留分子量增加至80KD时，虽然膜通量大大加大，但是药液长期放置时仍会有絮状物出现。因此，综合考虑成品的色泽、稳定性、成本等方面的因素，在本研究中选择截留分子量为20KD的UPIS503膜组件。

2.2 膜分离的正交设计除了膜组件的材料和孔径大小外，操作参数也会影响膜分离的效果。在本研究中，就操作压力、进料流速、药液温度对膜分离效果进行了考察。正交设计的因素水平表见表2。其中膜分离前药液体积为1 000 ml，异嗪皮啶为0.121 mg/ml，异嗪皮啶/干膏为1.662 mg/g，膜组件为截留分子量20KD的PS中空纤维膜。

正交实验结果直观分析及方差分析分别见表3～4。由表可知，各试验号的透过液干膏中异嗪皮啶含量与膜分离前相比都有增加，分别以平均膜通量和异嗪皮啶膜透过率及异嗪皮啶/干膏为考察指标时，影响因素的主次关系依次皆为：B>C>A，方差分析表明，所考察的因素中操作压力与温度对平均膜通量有显著性影响，但对其它2个考察指标都没有显著性的影响。考虑到提高膜设备的工作效率，选择较好的膜分离操作参数为：压力0.08 MPa，料液温度40℃，进料流速2.8 min/L。

表1 不同截留分子量的膜对血康口服液膜分离效果的影响（略）

表2 膜分离血康口服液药液的正交设计因素水平（略）

表3 膜分离血康口服液药液的实验结果及直观分析（略）

2.3 药效学实验本研究中对利用膜分离新工艺制备的药液药效作用也进行了考察。结果见表5。由表可知，与模型组相比，醇沉工艺组的两个剂量组都有显著的升血小板作用，能使阿糖胞苷导致的小鼠血小板减少恢复至正常水平，而膜工艺的高剂量组有显著升血小板作用，低剂量组虽然也有升血小板的功效，尽管增加的趋势没有统计学意义。

表4 膜分离血康口服液正交实验结果的方差分析方差来源（略）

表5 血康口服液超滤与传统工艺制备的药液对阿糖胞苷致小鼠血小板减少的影响（略）

与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

2.4 膜分离工艺与醇沉工艺技术指标比较膜分离新工艺与传统水提醇沉工艺的技术指标比较结果见表6。由表可知，醇沉工艺的异秦皮啶保留率大大高于膜分离工艺，后者的损失主要来自于微滤预处理时和超滤时膜管及导管的药液滞留，然而醇沉工艺的产品色泽较差，澄清度同样也不好，而膜分离新工艺制得的药液色泽大为改善，为棕红色，很澄清。

表6 新工艺与传统工艺制备的药液技术指标比较（略）

3 讨论

膜分离是以浓度差和为驱动力的操作手段。药液性质及膜设备操作参数完全相同时，膜分离效果主要取决于膜组件本身的性能。本研究结果表明，膜截留分子量的增加，透过液得到的干膏更多，表明有更多的物质透过膜，异嗪皮啶/干膏指标也上升，但是当分子量增加至60～80 KD异嗪皮啶/干膏指标呈下降趋势，说明低于截留分子量的其它物质膜透过速率快于异嗪皮啶。膜分离操作参数的正交试验结果显示，进料流速、操作压力、料液温度3因素对膜通量有较明显的影响，而对透过液干膏中的异嗪皮啶含量及异嗪皮啶膜透过率都没有显著影响，这也表明要通过这些操作参数的改变来提高后此两项指标难于取得很好的效果。因此，为了提高膜分离血康口服液的工作效率，在选择操作参数时，主要考虑对膜通量的影响，根据膜设备及膜介质的性质，选择合适大的压力和尽量使料液温度高一些，但是不能太接近膜所能耐受的最高温度。温度的影响主要是通过改变药液的粘度，膜组件最高耐受温度一般不超过50℃，因此本研究中选择的药液温度为40℃。适当提高压力可使药液透膜速率加快，但是压力太大又会导致膜表面的浓差极化及膜污染加重，因此压力的选择以不超过临界压力为宜。进料速度应尽量快一些，这样可以减小膜表面浓差极化或沉淀物的形成。目前针对血康口服液的基础研究较薄弱，究竟是其中什么成分的发挥药效作用仍然不清楚，异嗪皮啶含量只作为一个监测指标而已。虽然膜透过液的异嗪皮啶含量低于传统的水提醇层工艺，但药效学实验表明，灌用相同的生药量时，前者的升血小板功效与后者仍然相当，并没有明显下降，这也说明起药效作用的还有其它成分。

参考文献：

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