加味四妙方抗痛风作用有效部位的药效学研究

作者：胡新 时乐 徐立 尹莲

【关键词】 四妙方；，，有效部位；，，药效学

摘要：目的：观察加味四妙方（简称全方）各部位的抗炎、镇痛作用及对痛风性关节炎的影响，探讨全方治疗痛风作用的有效部位。方法：采用尿酸钠结晶致大鼠足肿胀法、化学刺激引起小鼠扭体反应、二甲苯致小鼠耳肿胀，观察全方及各部位的抗炎、镇痛作用。结果：全方、有机酸能显著减少小鼠扭体次数(P<0.01)。全方、黄酮、生物碱、皂苷能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01)，有机酸、水溶性成分，挥发油也有一定的抑制作用(P<0.05)。对由尿酸盐引起的大鼠足肿胀，全方和水溶性成份组在1～6 h内，均有抑制作用(P<0.01或P<0.05)，黄酮组大鼠足肿胀率均低于模型组，在 1，5 h和6 h有统计学的差异(P<0.01或P<0.05)，有机酸组在1、3和5 h对鼠足肿胀率也有一定的抑制作用(P<0.05)。结论：有机酸体现出了抗炎、镇痛和抗痛风的综合作用。

关键词：四妙方； 有效部位； 药效学

对四种加味四妙方方剂进行了药理学比较， 实验结果表明：加用了土茯苓的四妙方具有明显的抗炎作用，而且起效快、作用维持时间长，无明显毒性反应。本实验采用分部位提取的方法分离出黄酮、皂苷、有机酸、挥发油、生物碱、水溶成分等［1］，在此基础上，拟对全方各部位开展进一步药效学研究，以期寻找出加味四妙方发挥作用的有效部位。

1 实验材料

1.1 动物昆明种小鼠，SD大鼠，雄性。由南京中医药大学实验动物中心提供，实验动物饲养许可证号：SYXK(苏)20020012。

1.2 药物全方，2.73 g生药/ml；生物碱，5 g生药/m1；黄酮，5 g生药/m1；有机酸，5 g生药/ml；皂苷，7.5 g生药/m1；水溶性部位，7.5 g生药/ml；挥发油，15 g生药/m1；批号:031016。微晶型尿酸钠(MSU)，批号：030328。以上药物由南京中医药大学中药化学教研室提供。吲哚美辛25 mg/片，广东华南制药厂，批号：020602；冰醋酸，上海试剂四厂，批号：020430；二甲苯，上海凌峰化学试剂有限公司，批号：020402。

1.3 仪器 9 mm打孔器；鼠足容积测定器，自制；JA1203上皿电子天平，上海天平仪器厂。

2 实验方法

2.1 对醋酸引起化学性刺激的镇痛作用［2］将小鼠随机分为模型组、阳性组、全方组、生物碱、黄酮、有机酸、皂苷、水溶性成分、挥发油等9组，分别灌给生理盐水、吲哚美辛、全方、生物碱、黄酮、有机酸、皂苷、水溶性成分、挥发油。给药后30 min腹腔注射0.7%醋酸0.2 ml/只，观察小鼠第1次因疼痛引起扭体的时间和20 min内扭体次数。结果见表1。

结果表明，全方、有机酸能明显减少小鼠扭体次数，与模型组相比，有显著性差异（P＜0.01)。

2.2 加味四妙方对二甲苯所致的耳肿胀的抗炎作用［3］小鼠分组同上，分别灌胃给药，连续3 d。第3天给药后45 min，于小鼠右耳两面涂二甲苯0.025 ml/只致肿，左耳不涂为正常耳。45 min后脱颈椎处死小鼠，用9 mm打孔分别在相同部位打下圆片，电子天平称重，每鼠右耳重量左耳重量=肿胀度。结果见表2。

结果表明，全方、黄酮、生物碱、皂苷对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用(P<0.01)，有机酸组、水溶性成分组、挥发油组也有一定的抑制作用（P＜0.05）。

2.3 加味四妙方对尿酸盐所致足肿胀的抗痛风作用［4］大鼠分组同上，分别灌胃给药，连续5 d。第5天灌胃后，用鼠足容积测定器测量大鼠右后足容积，记录。于右后足关节腔内注射MSU0.2 ml/只（100 mg/ml），1，2，3，4，5，6 h后分别测量大鼠右后足容积，计算足肿胀率。肿胀率=（注射MSU后大鼠右后足容积-注射MSU前大鼠右后足容积）/注射MSU前大鼠右后足容积。结果见表3。

表1 加味四炒方对化学性刺激的镇痛作用（略）

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，n=10

表2 加味四炒方对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用（略）

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，n=10

表3 加味四炒方抗痛风作用的结果（略）

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，n=8 结果表明，全方和水溶性成份组在造模后1～6 h内，均能抑制大鼠的足肿胀率（P＜0.01或P＜0.05），黄酮组大鼠足肿胀率均低于模型组，且在1，5 h和6 h有统计学的差异（P＜0.01或P＜0.05），有机酸组在1，3 h和5 h对鼠足肿胀率也有一定的抑制作用（P＜0.05）。

3 结论

采用醋酸引起的小鼠化学性刺激模型、二甲苯所致的小鼠耳肿胀模型、尿酸盐所致大鼠痛风性关节炎模型，对加味四妙方各部位进行评价。结果表明，全方有抗炎、镇痛和抗痛风作用(P<0.01工P<0.05)；有机酸有一定的抗炎镇痛作用(P<0.01或P<0.05)，在形成大鼠痛风性关节炎模型1，3 h和5 h后，也有一定的抗痛风作用(P<0.05)；水溶性成份有一定的抗炎和抗痛风作用(P<0.01或P<0.05)，但未表现出镇痛作用；黄酮对耳廓炎症有明显的抑制作用(P<0.01)，在1、5和6 h也表现出一定的抗痛风作用(P<0.01或P<0.05)。生物碱和皂苷仅对小鼠耳廓炎症有明显的抑制作用(P<0.05)，未表现出镇痛和抗痛风的作用。以上实验结果可以看出，加味四妙方的各部位都表现有一定的作用，但有机酸体现出了抗炎、镇痛和抗痛风的综合作用，因此，对本方抗炎、镇痛作用以及治疗痛风的有效部位的研究，可在有机酸的基础上进一步开展。

参考文献：

［1］ 时 乐，徐 立，尹 莲.四种不同加味“四妙散”抗实验性痛风作用的比较［J］.南京中医药大学学报，2005，21（2）：106107.

［2］ 陈 奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：378378.

［3］ 李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海：科学技术出版社，1991：300300.

［4］ Coderre TJ and Wall PD.Ankle joint urate arthritis in rat：an alternative animal model of arthritis to that produced by ffeund's adjuvant［J］.Pain，1987，28：379379.