关于乌司他丁在体外循环心脏手术中对细胞免疫功能的影响

【摘要】 目的：研究乌司他丁（UTI）对体外循环（CPB）心脏手术患者围术期外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞、IL2和 IL6含量变化的影响. 方法：30例拟行心脏瓣膜置换手术患者，分为2组，对照组未用药，实验组用UTI. 分别于麻醉前、术后4，8，24，48，168 h测定外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞、IL2和 IL6含量. 结果：对照组和UTI组患者术后4，8，24，48 h 时CD3，CD4，NK较麻醉前均下降（P<0.05）；但术后8，24，48 h UTI组CD3水平高于对照组（P<0.05），术后4，8，24，48 h UTI组CD4高于对照组（P<0.05），术后24，48 h UTI组NK细胞含量高于对照组（P<0.05）. 对照组患者术后4，8，24，48 h时血清IL2含量较麻醉前降低，IL6较麻醉前升高（P<0.05）；UTI组患者术后4，8 h时IL2含量较麻醉前降低（P<0.05），4，8，24，48 h时 IL6较麻醉前升高（P<0.05），术后4，8，24，48 h时UTI组IL2含量高于对照组（P<0.05，P<0.01），术后4，8，24，48 h UTI组IL6含量低于对照组（P<0.05）. 结论：乌司他丁对CPB患者围术期免疫功能有部分调节作用. 【关键词】 乌司他丁 心肺转流 心脏手术 免疫 0引言 体外循环诱发全身炎性反应（systemic inflammatory response，SIR）是多种原因引起的一种非特异性的影响全身各主要器官的疾病，其严重程度和正确有效的处理与患者术后的恢复有密切的联系［1-3］. 本研究观察乌司他丁在体外循环(cardiopulmonary bypass， CPB)条件下进行心脏手术的患者的细胞免疫功能的影响. 1对象和方法 1．1对象 选择体外循环心脏瓣膜置换手术患者30（男19，女11）例，年龄33~62岁，体质量48~75 kg，心功能II~III；术前均无糖尿病、免疫系统及内分泌系统疾病，无肝肾功能障碍及出凝血功能异常，围术期也不接受输血. 随机分为实验组(乌司他丁组)，对照组(未用药). 1.2方法 全部患者采用静吸复合麻醉. 行桡动脉、颈内静脉穿刺置管，分别监测平均动脉压以及中心静脉压. 静脉注射咪达唑仑3~5 mg，芬太尼5~10 μg/kg和维库溴铵0.1 mg/kg麻醉诱导，气管内插管后机械通气. 潮气量8~10 mL/kg，呼吸频率10~12次/min. 肝素用量为4 mg/kg. 术中静脉注射芬太尼(总量20 μg/kg)及吸入异氟醚维持麻醉，间断静脉注射维库溴铵0.1 mg/kg维持肌松，CPB中间断静脉注射安定，氯胺酮或异丙酚等. 体外循环采用德国STOCkERTC型人工心肺机、美国美敦力膜式氧合器、广东顺德德润管及接头. CPB预充1100 mL乳酸林格液，500 mL 40 g/L琥珀酰明胶代血浆，200 g/L白蛋白100 mL. 预充液内加入肝素2000 U，体内肝素化剂量为400 Ｕ／kg，使ＣＰＢ中ＡＣＴ(激活全血凝固时间)维持４８０ s以上. 红细胞压积在２０％～３０％. 给药方法：乌司他丁２万U／kg，其中麻醉诱导后至体外循环前由颈内静脉均速滴入1/3量，体外循环机内预冲1/3量，开放主动脉后给予1/3量. 术后第１，２，３日予0.5万U静脉点滴，对照组予等量生理盐水. 分别于手术前、术后4，8，24，48，168 h，抽取2 mL外周静脉血于肝素抗凝管或EDTA抗凝管，采用流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群（CD3，CD4，CD8，CD3+CD4/CD3+CD8）含量，放射免疫分析法（平衡法）测定NK细胞含量. 用干燥管抽4 mL外周静脉血以放射免疫分析方法（平衡法）测定（试剂由北京东雅生物技术研究所提供），检测IL2和IL6含量，测定灵敏度分别为100 pg/mL和50 pg/mL. 统计学处理: 计量数据以x±s表示， 采用SAS软件包进行统计学处理. 以P<0.05为差别有统计学意义. 2结果 两组患者性别、年龄、体质量、鼻咽温、CPB时间、阻断时间均无统计学差异（P>0.05， 表1）.表1两组患者的一般临床资料(略) 2.1外周血T淋巴细胞亚群数量和分类两组患者麻醉前CD3，CD4， CD8，CD4/ CD8 及NK细胞无统计学差异（P>0.05），术后 4，8，24，48 h时CD3，CD4，NK较麻醉前均下降（P<0.05）；但术后8，24，48 h乌司他丁组CD3水平高于对照组（P<0.05），术后4，8，24，48 h乌司他丁组CD4高于对照组（P<0.05），术后24，48 h乌司他丁组NK细胞含量高于对照组（P<0.05， 表2）.表2两组患者的外周血T淋巴细胞亚群测定结果和NK细胞含量（略） 2.2血清IL2 及IL6含量对照组和乌司他丁组患者术后4，8 h IL2和IL6含量均有改变(表3）.表3两组患者外周血IL2和IL6含量（略） 3讨论 麻醉和手术对免疫系统的影响倍受重视［4-6］， 创伤后机体免疫功能存在抑制或缺陷，并以细胞免疫功能抑制为主［4-6］，免疫抑制状态的持续时间越长，并发感染或脓毒血症致死亡率越高. 本实验观察的T淋巴细胞亚群CD3， CD4， CD8均是T细胞重要的表面抗原标志（属T细胞辅助受体），作为免疫效应细胞在直接杀伤靶细胞进行免疫调节等方面发挥着重要作用，CD3+CD4/CD3+CD8比值可以用来评价自身免疫失调或疑是免疫失调. T淋巴细胞亚群的变化基本可以反映出创伤及术后患者的细胞免疫状态，故其已被广泛作为评估损伤后细胞免疫机能变化的标准［7-8］. 本研究中，CPB、麻醉和手术后很快就出现了CD3，CD4细胞百分率和CD3+CD4/CD3+CD8比值的下降，表明CPB、麻醉和手术刺激对细胞免疫功能的抑制相当明显. 乌司他丁为一种具有多种特殊药理性质的糖蛋白，能够改善循环，清除自由基及抑制炎症介质的释放［9-12］， 从而减轻体外循环心内视手术对机体造成的损伤. 本研究结果也说明了乌司他丁具有减弱体外循环心内视手术对患者细胞免疫抑制的作用. IL2合成能力与患者所耐受创伤的能力呈正比，IL2合成越多，对创伤耐受性越强， IL2是机体免疫网络中起调节作用的细胞因子之一［13］. 血清IL6与外科手术创伤的严重程度成比例，其血清浓度的变化是组织损伤的早期和敏感的标记. IL6不仅参与了调节机体细胞介导免疫和体液免疫，且是传递急性时相反应的重要介质［14］，升高的水平和组织损伤的程度有关. 我们研究表明，术后IL2水平下降，IL6水平升高，但乌司他丁组IL2和IL6改变程度较轻微，且恢复较快. 提示乌司他丁不仅减轻CPB造成的心、肺缺血再灌注损伤［15］，而且炎症反应轻微，可以促进患者康复，缩短住院时间.

［2］Pandol SJ. Acute pancreatitis［J］. Curr Opin Gastroenterol， 2005， 21(5):481-486.

［3］Malangoni MA， Martin AS. Outcome of severe acute pancreatitis［J］. Am J Surg， 2005，189(3):273-277.

［4］Takeyama Y. Significance of apoptotic cell death in systemic complications with severe acute pancreatitis［J］. J Gastroenterol， 2005， 40(1):1-10.

［5］Uehara S， Gothoh K， Handa H， et al. Immune function in patients with acute pancreatitis［J］. J Gastroenterol Hepatol， 2003， 18(4):363-370.

［6］Takeyama Y， Takas K， Ueda T， et al. Peripheral lymphocyte reduction in severe acute pancreatitis is caused by apoptotic cell death［J］. J Gastrointest Surg， 2000， 4(4):379-387.

［7］Pellegrini JD， De AK， Kodys K， et al. Relationships between T lymphocyte apoptosis and anergy following trauma ［J］. J Surg Res， 2000， 88(2): 200-206.

［8］Dalton HJ. Tcell responses in burn infection ［J］. Crit Care Med， 2001， 29(12):2386-2387.

［9］Tsujino T， Komatsu Y， Isayama H， et al. Ulinastatin for pancreatitis after endoscopic retrogradecholangiopancreatography: a randomized， controlled trial［J］. Clin Gastroenterol Hepatol， 2005， 3(4):376-383.

［10］MolorErdene P， Okajima K， Isobe H， et al. Inhibition of lipopolysaccharideinduced tissue factor expression in monocytes by urinary trypsin inhibitor in vitro and in vivo［J］. Thromb Haemost， 2005，94(1):136-145.

［11］Ito K， Mizutani A， Kira S， et al. Effect of Ulinastatin， a human urinary trypsin inhibitor， on the oleic acidinduced acute lung injury in rats via the inhibition of activated leukocytes［J］. Injury， 2005， 36(3):387-394.

［12］Inoue K， Takano H， Shimada A， et al. Urinary trypsin inhibitor protects against systemic inflammation induced by lipopolysaccharide［J］. Mol Pharmacol， 2005， 67(3): 673-680.

［13］Curley P， Nestor M， Collins K， et al. Decreased interleukin2 production in murine acute pancreatitis: potential for immunomodulation［J］. Gastroenterology， 1996， 110(2): 583-588.

［14］Pallua N， Low JF， von Heimburg D. Pathogenic role of interleukin6 in the development of sepsis. Part 11: Significance of antiinterleukin6 and antisoluble interleukin6 receptoralpha antibodies in a standardized murine contact burn model［J］. Crit Care Med， 2003， 31(5):1495-1501.

［15］徐康清，孙培吾，陈秉学，等. 乌司他丁对体外循环心脏手术患者肺炎性反应的影响［J］. 中华麻醉学杂志， 2002， 22(6): 325-328.