新疆圆柏叶药材质量标准的探讨

作者：玛依拉·买买提依明，满尔哈巴·海如拉，于睿，杨伟俊

【摘要】 目的建立新疆圆柏叶药材质量标准。方法采用显微鉴别法、理化鉴别法、薄层色谱法、挥发油测定法进行定性鉴别。结果建立了简便、灵敏、重复性好的鉴别方法。结论为有效评价新疆圆柏叶质量提供依据。

【关键词】 新疆圆柏叶; 维吾尔医药; 质量标准

本品为柏科(Cupressaceae)植物新疆圆柏Sabina vulgaris Antoine的干燥枝叶，多年生小灌木，喜生于沙石的山坡上。新疆圆柏枝叶为维吾尔族习用药材，维吾尔语名为“Arqa yopurmige”，汉语名为“新疆圆柏叶”。我国主产于新疆，亦产于青海、江西、内蒙古等地;国外俄罗斯、蒙古、巴基斯坦、北欧、伊朗等地亦有分布。嫩枝叶和果实是新疆圆柏的主要药用部位。新疆圆柏作为一种天然植物，在新疆广大地区均有生长，其自然资源十分丰富，含有多种化学成分如黄酮类、挥发油类、萜类、木质素类等，具有多种生理功能和药用价值如抗肿瘤作用、心血管系统作用等，具有驱风镇静、活血止痛等功能，用于风湿性关节炎，小便不利，迎风流泪，视物不清等[1]。 维吾尔医临床用于风寒头痛、风湿性关节炎等疑难病症的治疗[2]。国内学者对新疆圆柏叶的研究主要集中在对其化学成分及生理活性的研究上，对其质量标准研究未见文献报道，目前国家标准和地方标准均未见收载。因此，为了给该药材的质量评价提供理论依据，我们对新疆圆柏叶药材进行初步研究并起草了其质量标准。

1 材料与仪器

1.1 材料新疆圆柏枝叶药材采自新疆石河子清水河，由新疆药物研究所张彦福研究员鉴定为柏科植物新疆圆柏Sabina vulgaris Antoine的干燥叶。

1.2 试剂芦丁对照品(批号080409， 上海融禾医药科技有限公司);硅胶G预制板(青岛海洋化工厂分厂);水为蒸馏水，乙醇等其它试剂均为分析纯。

1.3 仪器OLYMPUS CX31型照相显微镜(北京泰克仪器有限公司，型号7K13884);旋转蒸发仪(巩义市子华仪器有限公司，型号RE-501);电子天平(余姚纪铭称重校验设备有限公司，型号10002);分析天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司，型号D000000246); DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱(上海齐欣科技仪器有限公司);挥发油提取器;ZF-20D暗箱式紫外分析仪(巩义市予华仪器有限责任公司)。

2 方法与结果

2.1 性状鉴别本品多分枝，小枝扁平，枝灰棕褐色，老枝暗褐色，光滑。叶交互对生;菱形或菱状卵圆形，叶细小鳞片状，鳞叶相互紧覆，长1～2.5 mm，先端钝或微尖，全缘，下面中部生有椭圆形腺体，刺形叶生于幼龄植株上，有时壮龄植株亦有少量刺形叶，排列紧密，向上斜伸不开展，长3～7 mm，上而凹入，中肋明显，被白粉。叶贴伏于枝上，深绿色或黄绿色。质脆，易折断。气清香，味苦涩、微辛。

2.2 显微鉴别

2.2.1 切片的制作方法取材→软化→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→粘贴→脱蜡→染色制片→封藏→贴标签。

2.2.2 嫩枝横切面呈椭圆形，中央为小枝部分，两侧为鳞片状叶。鳞叶表皮细胞1列，排列整齐，外被厚角质层;鳞叶中部有较大的类圆形或椭圆形的空腔;叶肉栅栏细胞短柱状，海绵组织细胞较大、排列疏松;小枝部下皮细胞类长方形，排列整齐，木质部由管胞组成;中央髓部扁小，髓射线明显。见图1。1.表皮细胞 2.叶肉组织 3.小枝韧皮部4.小枝木质部 5.小枝髓部图1 圆柏叶横切

2.2.3 粉末装片制作方法将药材研粉→过60目筛→置载玻片上→加水合氯醛1～2滴透化→加甘油1~2滴→盐酸间苯三酚染色→装片→显微下观察。

2.2.4 粉末特征粉末绿色，表皮细胞类长方形，长47.5～125 μm，宽为12.5～25μm;气孔甚多，凹陷形，保卫细胞较大，长径约为50μm;纤维细长，单个或成束，直径约7.5～20μm;木薄壁细胞多见，长为30～72.5μm，宽为17.5～42.5μm。见图21.木薄壁细胞 2 .表皮细胞 3.纤维 4.气孔图2 圆柏叶粉末

2.3 理化鉴别取本品粗粉(过20目筛)0.5g，加甲醇5ml，振摇后浸渍1h，滤过，滤液供下述实验：①取滤液1ml，加三氯化铁试液1～2滴，溶液变为墨绿色。②取滤液1ml，加5%亚硝酸钠和5%硝酸铝各5滴，混匀，加5%氢氧化钠溶液5滴，溶液变为红色。

2.4 薄层鉴别

2.4.1 对照品溶液的制备取芦丁对照品1.5 mg，加甲醇10 ml制成0.15 mg/ml的对照品溶液。

2.4.2 供试品溶液的制备取本品粗粉1 g，加40 ml 50%甲醇，在80℃水浴加热回流提取1 h， 乘热过滤，水浴蒸干，残渣用20 ml热水溶解，置分液漏斗中，第1次用石油醚(60~90 ℃)20 ml萃取;第2次用醋酸乙酯30 ml萃取;第3次用正丁醇30ml萃取，水浴蒸干，残渣加2 ml甲醇溶解，作为供试品溶液[3]。照薄层色谱法试验[4]，取正丁醇部分样品及芦丁对照品(0.15 mg/ml)各2μl点于硅胶G预制板上，用醋酸乙酯-甲酸-水(8∶1.5∶0.5)展开，取出凉干，用1%三氯化铝乙醇溶液显色，置紫外灯(365 nm)观察，结果样品与对照品在同一位置上显相同颜色的荧光斑点。见图3。1～3.正丁醇供试品溶液 4.芦丁对照品溶液图3 圆柏叶薄层鉴别

2.5 挥发油测定照挥发油测定法(《中国药典》2005年版Ⅰ部，附录X D)测定[4]， 取新疆圆柏枝叶粗粉150 g(过20目)，置1 000 ml圆底烧瓶中，加600 ml水，加数粒玻璃珠，置电热套中，接的挥发油提取器及冷凝管，加热回流提取挥发油，并保持微沸约5 h，得3.8 ml挥发油，2.53%(ml/g)。暂定本品挥发油含量不得少2%(ml/g)。

3 讨论

本研究首次对新疆圆柏叶药材进行了质量标准初步研究，为控制药材内在质量、为进一步开发利用新疆圆柏叶资源奠定基础。

根据文献[2]报道，从新疆圆柏的醋酸乙酯部位中分离得到了芦丁等9个黄酮类化合物，因此我们选用芦丁为对照品，建立了黄酮薄层色谱检查项，进行了薄层鉴别试验，结果该鉴别方法简单、薄层色谱斑点清晰、显而易见、重复性好。在薄层分离过程中，曾用3种展开剂进行薄层层析分离，但醋酸乙酯部位在前2种展开剂中与对照品溶液相同位置无相同的斑点，正丁醇部位在前2种展开剂中与对照品溶液有相同的斑点，但展开效果不够理想，因此再次调整展开剂的比例，改用第3种展开剂后，展开效果明显改善，正丁醇萃取部位与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。

根据文献[5]新疆圆柏枝叶含有挥发油成分，该植物具有浓郁芳香气味，维吾尔药的功效体现在多种成分的协调作用上。因此为控制该药材内在质量，以测定挥发油含量为考察指标，对其进行挥发油含量测定，暂定本品挥发油含量不得少于2%(ml/g)。

该质量标准研究过程中，只收集到一批药材并仅对其性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、薄层鉴别、挥发油测定进行初步探讨，今后还需要逐步扩大样本量且进一步补充、完善其它鉴别、检查项，才能全面反映各地药材的质量信息。