关于188 Re┐HAb18F（ab）2 在荷瘤鼠体内的药代动力学

【关键词】 188，Re

关键词:188 Re;药代动力学;裸小鼠;单克隆抗体;肝癌

摘 要:目的 研究188 Re标记的肝癌单抗片段HAb18F（ab’）2 在荷肝癌裸鼠体内的药代动力学，求取药代动力学参数，建立药代动力学模型. 方法 5组裸鼠经尾静脉注入1.85MBq188 Re-HAb18F（ab’）2 ，在不同时间点处死裸鼠，测量血及各脏器放射性计数.用3P97药代动力学软件处理188 Re-HAb18F（ab’）2 给药后荷瘤鼠各时间点的血液放射性浓度及各主要脏器的放射性浓度，计算药代参数. 结果 188 Re-HAb18F（ab’）2 在裸鼠体内药代动力学参数分别为T1/2 2.29h，Vd1.49L，AUC20.49×109 Bq・h・L-1 ，CL0.45×10-3 L・h-1 .

188 Re-HAb18F（ab’）2 特异性聚集于肿瘤中，在瘤体中以较高水平维持较长时间，在正常组织中代谢较快，主要从肾脏中排泄. 结论 188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷肝癌裸鼠体内药代动力学符合线性一室模型.

Keywords:188 Re;pharmacokinetics;nude mice;monoclonal antibody;hepatoma

Abstract:AIM To establish the pharmacokinetic model of188 Re-HAb18F（ab’）2 and to evaluate its pharmacokinetic pa┐rameters.METHODS The mice was sacrificed at different time after188 Re-HAb18F（ab’）2 i.v.injected into hepatoma-bearing nude mice.The blood and organs’radioactivity were measured.The concentrations of188 Re-HAb18F（ab’）2 were evaluated with a pharmacokinetic3P97software.RESULTSParameters of188 Re-HAb18F（ab’）2 were T1/2 2.29h，Vd1.49L，AUC20.49×109 Bq・h・L-1 ，CL0.45×10-3 L・h-1 .188 Re-HAb18F（ab’）2 was located specially in hepatoma with high selective reactivity of HAb18F（ab’）2 .188 Re-HAb18F（ab’）2 was mainly eliminated by kidney.CONCLU┐SION Pharmacokinetics of188 Re-HAb18F（ab’）2 conforms to a l-compartment model.

0 引言

188 Re是一种新型放射性核素，其良好的核物理性质使其有望成为一种新的治疗性核素.现对188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷瘤鼠体内的药代动力学进行研究［1］ ，证明其是否选择性在瘤体内聚集，建立药代动力学模型，获取药代动力学参数，为188 Re-HAb18F（ab’）2 临床治疗提供依据.

1 材料和方法

1.1 肿瘤动物模型 选5周龄BALB/c裸鼠（由本校实验动物中心提供），于其右下肢根部sc人HCC（hepatocellular carcinoma，肝细胞肝癌，由中科院上海细胞所细胞库提供）细胞1×107 （0.2mL），肿瘤长至直径1cm左右时待用.

1.2 McAb及放射性核素标记 HAb18为鼠源性抗人肝细胞瘤McAb，IgG1 亚型.HAb18IgG用胃蛋白酶消化法消化，经Phenyl-sepharoseHP柱（Amersham pharmacia）纯化，即得纯度大于95%的F（ab’）2 ，SDS-PAGE鉴定其相对分子质量约为11×104 .采取188 Re直接法标记F（ab’）2［2］ ，即F（ab’）2 经2-硫基乙醇还原后，加入含有稳定剂葡庚糖酸钠的亚锡和188 ReO4- ，37℃反应2～3h.纸层析法测定标记率>90%.

1.3 荷瘤鼠体内分布研究 荷瘤裸鼠15只，随机分为5组，每组3只，每只鼠尾静脉给188 Re-HAb18F（ab’）2 1.85MBq，分别于1，4，18，24和48h各处死1组，取血及各主要脏器，称重，用γ-放射免疫计数仪（国营262厂医用核仪器分厂）测定单位重量各脏器中每分钟闪烁数值（cpm），求取肿瘤与非肿瘤脏器单位重量的cpm比值（T/NT）及每克脏器中摄入放射性占给药量的百分比（%ID・g-1 ）.

1.4 药代动力学研究 用3P97药代动力学软件计算血及各脏器药物浓度值，求取药代动力学参数，建立药代动力学模型.

2 实验结果

Tab1示各时间点药物浓度值，表明其生物学分布.血药浓度经3P97软件计算，显示其符合线性一室模型，在初值拟合曲线也反映一室模型的拟合效果满意，Fig1为药代动力学曲线.血药动力学参数见Tab2.各组织半衰期（h）是:肿瘤（32.99），血（2.29），肺（5.67），骨（11.76），肌肉（9.22），小肠（7.47），大肠（15.08），胃（11.49），心脏（2.29），肝（5.67），脾（19.76），肾（11.53）.

3 讨论

188 Re发射2110kevβ射线，155kevγ射线，半衰期17h，具有良好的核物理性能，有望成为新的治疗性核素.188 Re从188 W-188 Re发生器得到，来源方便，具有很高的放射性比活度，利于单抗标记.动物实验证实，

188 Re标记的肝癌单抗片段HAb18F（ab’）2 具有明显的抑癌效应.而有关188 Re-HAb18F（ab’）2 在动物体内的药代动力学研究未见全面报道［3，4］ .

从Tab1中可见，188 Re-HAb18F（ab’）2 在肿瘤中放射性以较高水平维持较长，在18h仍维持较高水平.从T/NT值中可看出，除肾脏外，其余T/NT值均较高，说明其特异性地集中于肿瘤细胞，在其他脏器中代谢较快，有利于减少其对正常组织的损伤.瘤/血比值在48h达到最高，瘤/肝比值在18h达到最高.从Tab1中还可见，肿瘤在给药后1，4和24h的放射性分别占3.83%，6.48%和9.47%，肝脏的放射性分别占1.64%，2.59%和3.19%，肾脏放射性分别占76.2%，78.8%和76.3%，这提示抗体片段及其代谢物主要经过肾脏排泄，胃、肌肉、肺、脾等分布较少［5-8］ . 188 Re-HAb18F（ab’）2 在肿瘤组织的半衰期达32.99h，均比其他组织的半衰期长，说明188 Re-HAb18F（ab’）2 选择性地在肿瘤部位浓聚，且衰减速度慢.这也说明单克隆抗体对肿瘤组织的特异性结合，而对正常组织的毒副作用小.

血药浓度经3P97软件计算及从Fig1中可见，188 Re-HAb18F（ab’）2 在血中代谢为线性一室模型，说明188 Re-HAb18F（ab’）2 瞬间分布至全身，且药物浓度保持动态平衡，药物恒比规律从消除器官中消 除，血液中药物浓度与消除速度成正比，药物的血浆半衰期不变.药物浓度越高，消除速度越快，药物浓度越低，消除速度越小［9-12］ .

表1 188 Re-HAb18F（ab’）2 在1，4，18，24和48h在荷肝癌裸鼠体内分布略

表2 188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷瘤鼠体内药代动力学参数略

图1 略

188 Re-HAb18F（ab’）2 在血液中的半衰期为2.99h，而在肿瘤中的半衰期为32.99h，放射性在肿瘤组织中减少之前，已从血中代谢一部分，使全身血液循环血中放射性减少.同时188 Re-HAb18F（ab’）2 血液半衰期为2.29h也远小于188 Re物理半衰期17h，这样188 Re-HAb18F（ab’）2 可在体内经血液迅速消除，具有良好的临床应用价值［13-15］ .

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