肝靶向药物米托蒽醌毫微球与米托蒽醌急性及延迟毒性的比较研究

作者：王沼丹 叶晓林 杨云霞 包定元

【摘要】 目的：比较米托蒽醌(mitoxantron，DHAQ)及其肝靶向制剂聚氰基丙烯酸正丁酯毫微球(mitoxantronepolybutylcyanoacrylatenanosphere，DHAQPBCANS)小鼠静脉注射的毒性。方法:昆明种小鼠一次性静脉注射两种制剂的药物后观察7天内的死亡率，延续观察14天、21天内的死亡情况，计算半数致死量(LD50)。此外，还观察多次用药的毒性情况。结果:DHAQ制成靶向制剂DHAQPBCANS后急性毒性和延迟毒性均有所下降，但都表现出有一定的延迟毒性，7、14、21天的LD50分别是，DHAQ：11.27±2.21、9.33±1.82、8.18±1.60 mg/kg，DHAQPBCANS：14.73±6.03、10.47±4.30、9.01±3.99 mg/kg。多次用药的LD50分别是DHAQPBCANS：4.225±0.798 mg/kg，DHAQ：3.670±0.627 mg/kg。结论:DHAQ和DHAQPBCANS均有一定的延迟毒性，但DHAQPBCANS的急性毒性和延迟毒性均低于DHAQ。

【关键词】 米托蒽醌;毫微球;急性毒性，延迟毒性

米托蒽醌(mitoxantrone， DHAQ)是一类广谱抗癌药，研究证明有一定的延迟毒性。毫微球(nanosphere， NS)是一种新型的药物载体，研究证明其具有明显的肝靶向性，用于载带抗肝癌药物可提高疗效，降低毒副作用。米托蒽醌聚氰基丙烯酸正丁酯毫微球(mitoxantronepolybutycyanoacrylatenanosphere)，简称米托蒽醌毫微球(DHAQPBCANS)，其静脉注射剂研究证明具有良好的肝靶向性和抗肝癌效果[1]，本文在此基础上进一步研究比较这两种制剂的小鼠的急性毒性和延迟毒性。

1 实验材料

米托蒽醌毫微球(DHAQPBCANS)，蓝色固体团块，四川大学华西药学院提供，4.24mg/支和6.86mg/支，含量分别为2.16mg/支和3.50mg/支(DHAQ量)，即载药量为51.03%，球径为55.82±12.46nm。米托蒽醌(mitoxantrone，DHAQ)，蓝色液体，成都制药六厂提供，规格2mg/2ml。昆明种小鼠，雌雄各半，20-22g，四川大学实验动物中心提供。

2 实验方法

2.1 一次性用药的毒性昆明种健康小鼠100只，依性别体重分为10组，每组10只，雌雄各半，分别尾静脉注射米托蒽醌毫微球、米托蒽醌注射液，注射剂量见表1，连续观察中毒反应并记录21d内每天的小鼠死亡数。半数致死量(LD50)和95%的可信限以Bliss法计算。急性毒性以注射后7d的LD50表示，以给药后动物在不同时间段的累计死亡数及百分率评价延迟毒性[2]。实验数据经SPSS11.5统计软件进行分析。

2.2多次用药的毒性小鼠以体重分为10组，每组10只，各组分别在第1、5、9d给相应药物，观察记录14d内动物死亡情况，用Bliss法计算LD50及95%的可信限[2]。给药方案与治疗学方案相同。

3 实验结果

3.1一次性用药的毒性 结果见表1、表2和图1。一次性用药后，DHAQ和DHAQPBCANS均表现出一定的延迟毒性，随着观察时间的延长，DHAQ和DHAQPBCANS的LD50值均降低，表现出一定的延迟毒性。但动物死亡大多集中在1周内，第三周只有个别动物死亡。但两药相比，DHAQPBCANS的毒性明显小于DHAQ，实验数据经SPSS11.5统计软件进行分析有显著性差异。表1 米托蒽醌和米托蒽醌毫微球的LD50值表2 米托蒽醌和米托蒽醌毫微球对小鼠延迟毒性的比较相应时间DHAQNS和DHAQ比较，P<0.05。图1 米托蒽醌和米托蒽醌毫微球累计死亡率示意图

3.2多次用药的毒性给药剂量以及结果见表1，DHAQPBCANS的毒性有所减低，其LD 50为4.225±0.798 mg/kg，DHAQ的LD 50为3.670±0.627 mg/kg。

4讨论

前期的药效学实验研究表明DHAQPBCANS的肝靶向效果明显，抑瘤效率大大提高，本研究表明在相同剂量情况下，肝靶向给药系统DHAQPBCANS的毒性明显小于DHAQ。由于DHAQ制成肝靶向制剂后，药物主要分布在肝脏，减少了DHAQ在心脏及其他脏器的分布，从而使DHAQ的毒性略有下降;而且，由于DHAQ制成肝靶向毫微球后可以减少DHAQ的用量，将会进一步降低其毒性。

延迟毒性是肿瘤细胞毒类药物的特性之一，也是毒理学的一个重要组成部分，研究的方法除观察血液、组织和器官损伤外，也以小鼠死亡为观察指标的方法[3]。观察延毒反应单剂量动物数一般以10～20只小鼠为多见，如以总动物总死亡数或总死亡率来表达，而且是多剂量组时，以一组10只即可。本文以小鼠死亡为观察指标，比较了DHAQ和DHAQPBCANS的延迟毒性。DHAQPBCANS和DHAQ均表现有一定的延迟毒性，但在相同的观察时间DHAQPBCANS的LD50值大于DHAQ，累计死亡率DHAQPBCANS略低于DHAQ。说明DHAQ制成肝靶向毫微球后由于药物在全身其他脏器分布减少而毒性有所降低。