童乐口服液的药效学研究

作者：王贵林 朱慧玲 张渊 杜亚明 朱路 李江 陈丁丁

【关键词】 口服液

摘要：目的探讨童乐口服液对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响及其解热、抗炎作用。方法正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验（吞噬百分率和吞噬指数），大鼠角叉菜胶足爪肿胀法，干酵母致大鼠发热实验。 结果童乐口服液提高正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀，高剂量组对于酵母所致大鼠发热有解热作用。结论童乐口服液能提高机体非特异性免疫功能，并具有一定的解热、抗炎作用。

关键词：童乐口服液； 巨噬细胞； 解热； 抗炎； 药效学

Pharmcodynamic Study on Tongle Oral Solution

Abstract:ObjectiveTo study the infuence of Tongle Oral Solution on phagocytic fuction of ceiac macrophages in normal mouse，its antipyretic and antiinflammatory effects in rats.MethodsPhagocytic percentage and phagocytic index of celiac macrophages were investigated in normal mouse，rats paw edema was caused by carrageenin and rat febril models were induced by injection of dry yeast subcutaneously ResultsTongle Oral Solution improved phagocytic fuction of celiac macrophages，inhibited carrgeenininduced rat paw edema，and also reduced fever caused by dry yeast in high dosage group. ConclusionTongle Oral Solution were shown to promote the nonspecific immunity and had some antipyretic and antiinflammatory effects.

Key words:Tongle Oral Solution; Macrophage; Antipyresis; Antiinflammation ; Pharmacodynamic

童乐口服液是湖北省荆州市中医医院儿科临床经验方，具有调和营卫、健脾益气、敛汗生津等功效，临床上用于治疗小儿反复呼吸道感染，取得了较好的疗效，具有治愈率高、复发率低、临床症状改善快、毒副作用小等优点。我们与该医院儿科合作，对本品进行主要药效学研究。

1 实验材料

1.1 药品及试剂童乐口服液由桂枝、黄芪、白芍、五味子、甘草、浮小麦、麦冬、沙参等中药组成，荆州市中医院药剂科提供，批号：20040520，含生药3 065 g・L1（原药液)，另取部分原药液在60℃水浴下浓缩3倍(浓缩药液)备用。阿司匹林肠溶片，石家庄神威药业股分有限公司生产。批号：0401311。角叉菜胶，日本进口，临用前生理盐水制成1％浓度。即发干酵母，梅山马利酵母有限公司生产，临用前加蒸馏水在乳钵中研磨，制成20％的酵母悬液。5％鸡红细胞悬 液的配制：按无菌操作从公鸡鸡翼下静脉取血，立即放入锥型瓶中，加5倍于血量的Alsever's 液，摇匀，置4℃冰箱保存。临用前吸取红细胞并用生理盐水洗涤3次，前2次以1 500 r/min离心，第3次以2 000 r/min 离心，各5 min，用生理盐水配成5％浓度备用。

1 .2 动物昆明种小鼠，体重19～22 g，雌雄兼用；Wistar大鼠，雌雄兼用。由长江大学医学院实验动物中心提供。

2 实验方法

2.1 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能实验取小鼠30只，随机分成3组：空白对照组，童乐口服液低剂量组（10 ml・kg1)，童乐口服液高剂量组（浓缩药液10 ml・kg1，相当于原药液30 ml・kg1）。各组灌胃给药，1次/d，连续7 d，对照组灌服等量生理盐水。末次给药后1 h，腹腔注射5％鸡红细胞悬液0.4 ml/只，5 h后脱臼颈椎处死动物，腹腔注射生理盐水2 ml，轻揉腹部1 min，用碘伏消毒腹部，剪开皮肤，抽取腹腔冲洗液，分滴于2 片载玻片上，0.2 ml/片。将载玻片放在垫有湿纱布的搪瓷盘中，置37℃温箱中孵育30 min，取出载玻片，用生理盐水漂洗除去未贴片的细胞，晾干，瑞特氏染液染色，显微镜下观察，每片计数100个巨噬细胞，按下式计算吞噬百分率（％）和吞噬指数。吞噬率％=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞×100％。吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞数/100个巨噬细胞。

2.2 抗炎实验（大鼠足爪肿胀法）取体重120~150 g健康大鼠40只，随机分成4组：对照组，童乐口服液低剂量组（10 ml・kg1)，童乐口服液高剂量组（浓缩药液10 ml・kg1，相当于原药液30 ml・kg1），阿司匹林组（0.25 g・kg1)。各组灌胃给药，1次/d ，连续5 d，对照组灌服等量生理盐水。第5日用软皮尺测量各鼠左右肢踝关节周长。末次给药后1h，分别在每鼠左后肢皮下注射1％角叉菜胶混悬液0.1 ml致炎，于注射后0.5，1 ，2，3，5 h分别测量踝关节周长，以致炎后与致炎前踝关节周长差值为肿胀度。各组结果以±s表示，组间均数的比较用t检验。

2.3 解热实验（对酵母致大鼠发热的影响）取体重150~200 g的健康大鼠，于实验室中适应3 d，室温（24±1)℃，湿度40％~55％，常规饮水喂养，测肛温2次/d(温度计插入肛门内深度为2 cm，保留3 min) 。实验前禁食10 h，自由饮水，实验当日测肛温1次/h，连续2次，取平均值为正常体温值。选取体温变化不超过0.3℃的动物供实验用。将合格动物40只随机分成4组，每组10只，背部皮下注射20％酵母悬液10 ml・kg1，每小时测肛温1次，6 h后各组动物分别按2.2项剂量灌胃给药1次。给药后1，2，4 h各测肛温1次。

3 实验结果

3.1 童乐口服液对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响童乐口服液低剂量组及高剂量组吞噬指数均明显高于对照组，通过对组间均数进行t检验，低剂量组与对照组比较，差异有显著性意义（Ｐ＜0.05)；高剂量组与对照组比较，差异有非常显著性意义（Ｐ＜0.01)。见表1。

3.2 童乐口服液对大鼠角叉菜胶足爪肿胀的影响童乐口服液低剂量组、高剂量组和阿司匹组致炎后肿胀度低于对照组。与对照组比较，童乐口服液低剂量组致炎后1 h和2 h，差异具有显著意义（Ｐ＜0.05)，致炎后0.5，3，5 h，差异具有非常显著性意义（Ｐ＜0.01)；童乐口服液高剂量组致炎2h，差异具有显著性意义（Ｐ＜0.05意义），致炎后0.5，1，3，5 h，差异具有非常显著性意义（Ｐ＜0.01)。见表2。

3.3 童乐口服液对于干酵母致大鼠发热的影响童乐口服液低剂量组无明显解热作用，高剂量组降低酵母菌致大鼠发热，与对照组比较，给药后2 h，差异具有非常显著性意义（Ｐ＜0.01)，给药后4 h，差异具有显著性意义（Ｐ＜0.05）。见表3。

表1 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（略）

表2 对大鼠角叉菜胶足肿胀的影响（略）

表3 对干酵母致大鼠发热的影响（略）

4 讨论

小儿反复呼吸道感染是儿科常见病、多发病之一，易反复发作，病程迁延，对儿童健康造成严重影响。祖国医学将该病归属于“体虚感冒”范畴，认为其病因病机主流是“肺脾肾三脏不足，营卫不和，复感 外邪。”童乐口服液方中桂枝辛散温通，可外行肌表而奏解表之功；白芍敛阴止汗，常与桂枝合用调和营卫；甘草补脾益气，黄芪益卫固表，补肺脾之气；沙参、麦冬益胃生津，五味子敛汗生津，固表益气、止汗。诸药合用具有调和营卫、健脾益气、敛汗生津之功效。 现代医学认为［1］，小儿反复呼吸道感染主要是多种原因对免疫系统造成损害，异致机体免疫功能下降，抗病能力减弱，多种病毒致呼吸道感染反复发作。在机体的免疫系统中，巨噬细胞对病毒的吞噬作用非常重要。首先，巨噬细胞具有吞噬处理和传递抗原的作用， 通过对吞噬的病毒进行消化、分解，将一部分抗原传递给T，B淋巴细胞，使其激活、增值，达到协同消灭病原体的目的［2］；其次，巨噬细胞能产生多种淋巴因子（TNF，IL1和IL6等）参与抗病毒免疫。在机体受到病毒感染后，巨噬细胞的吞噬功能受抑制，机体对病毒的防御能力降低。本文研究表明，童乐口服液能明显提高正常小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数，增强小鼠腹腔巨噬细胞的功能，抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀，对干酵母菌引起的大鼠体温升高也有一定的解热作用。提示本品能提高机体非特异性免疫功能，增强抗病能力，且具有解热、抗炎作用。为其临床应用提供了药效学依据。

［1］ 陈 禧.小儿反复呼吸道感染的西医结合">中西医结合治疗［J］.中医药学刊，2004，24（8）：1520

［2］ 高伟良.巨噬细胞在抗感染过程中的作用［J］.免疫学杂志，1997，13（1）：63.